微生物檢測驗(yàn)證技術(shù)

第一章 緒論
　一、驗(yàn)證的概念與內(nèi)涵
　二、驗(yàn)證的類型
　三、藥品微生物檢測驗(yàn)證的特點(diǎn)與影響因素
　　（一）微生物學(xué)檢測對象的特點(diǎn)
　?。ǘ┪⑸飳W(xué)檢測的特點(diǎn)
　?。ㄈ┪⑸飳W(xué)檢測的影響因素
　四、藥品微生物檢測驗(yàn)證技術(shù)的內(nèi)容
第二章 微生物檢測實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施與設(shè)備驗(yàn)證
　一、實(shí)驗(yàn)室設(shè)施與驗(yàn)證
　?。ㄒ唬?潔凈室（無菌室）
　　（二）毒菌種處理和微生物鑒別局部100級控制室
　?。ㄈ┛股匚⑸餀z定、細(xì)菌內(nèi)毒素檢查、抑菌實(shí)驗(yàn)的半無菌室
　?。ㄋ模┢渌遥ㄅ囵B(yǎng)室，試液及培養(yǎng)基的配制室或滅菌室，器皿洗滌、烘干室，實(shí)驗(yàn)室，辦公休息室）
　二、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備與驗(yàn)證
　　（一）儀器設(shè)備的管理原則
　?。ǘ?shí)驗(yàn)室設(shè)備的質(zhì)量保證和管理要求
　?。ㄈ┏瑑艄ぷ髋_的監(jiān)控規(guī)程與使用指南
　三、實(shí)驗(yàn)室操作所用玻璃器具（容器）的校正（驗(yàn)證）
　?。ㄒ唬┤萘科咳莘e的校正
　　（二）移液管（刻度管）容積的校正
　?。ㄈ┑味ü苋莘e的校正
　?。ㄋ模┬Ｕ萘績x器時的注意事項(xiàng)
　?。ㄎ澹┏Ｒ娙萘績x器的容量允差
　?。┪⒘考訕悠鞯男ｒ?yàn)
第三章 微生物檢測用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的使用及管理
　一、概述　
　?。ㄒ唬?biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌返膩碓?br />　?。ǘ?biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌返谋９?br />　　（三）標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌返拇鎯皖I(lǐng)用
　?。ㄋ模?biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌返匿N毀及使用記錄
　　（五）定期對標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌愤M(jìn)行抽樣檢查
　?。┨厥獾臉?biāo)準(zhǔn)品——菌種
　二、抗生素標(biāo)準(zhǔn)品
　?。ā┦褂门c保存
　?。ǘ┬r復(fù)核
　?。ㄈ┬r復(fù)核數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析實(shí)例
　　（四）效價復(fù)核數(shù)據(jù)的計(jì)算機(jī)統(tǒng)計(jì)處理
　三、微生物菌種的使用、保存與管理、驗(yàn)證
　　（一）制定菌種使用、保藏管理程序
　　（二）嚴(yán)格控制菌種的傳代、做好保藏工作
　?。ㄈ┏Ｓ镁N保藏方法
　?。ㄋ模┚N保藏標(biāo)簽的規(guī)范與要求
　　（五）嚴(yán)格菌種的質(zhì)量控制，確保菌種的質(zhì)量
　?。┚N處理的注意事項(xiàng)與有關(guān)記錄
　四、細(xì)菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品與鱟試劑
　?。ㄒ唬┘?xì)菌內(nèi)毒素國家標(biāo)準(zhǔn)品和工作標(biāo)準(zhǔn)品
　　（二）細(xì)菌內(nèi)毒素驗(yàn)證品
　　（三）凝膠鱟試劑靈敏度復(fù)核
　?。ㄋ模┕舛确?biāo)準(zhǔn)曲線的可靠性試驗(yàn)
第四章 消毒劑的使用及效力驗(yàn)證
　一、 消毒劑與滅菌劑的劃分
　?。ㄒ唬┬l(wèi)生處理與衛(wèi)生洗滌劑
　?。ǘ┫九c消毒劑
　?。ㄈ缇c滅菌劑
　二、微生物對消毒因子的敏感性
　三、消毒劑的效力等級與消毒效力評價
　四、影響消毒劑效力的主要因素
　?。ㄒ唬﹑H
　　（二）溫度
　?。ㄈ┯袡C(jī)物
　?。ㄋ模┍砻婊钚詣┖徒饘匐x子
　?。ㄎ澹┧?br />　五、消毒劑的作用方式
　?。ㄒ唬┦沟鞍踪|(zhì)變性、凝固
　?。ǘ┢茐幕驌p傷細(xì)胞膜
　?。ㄈ┳钄嗍澄飻z取和廢物排泄
　?。ㄋ模┾g化關(guān)鍵酶的活性
　六、細(xì)菌對消毒劑的耐受性
　?。ㄒ唬┚吣褪苄缘募?xì)菌和不能完全致死的消毒劑劑量
　　（二）分泌多聚糖樣物質(zhì)黏附細(xì)菌，共同形成生物膜
　?。ㄈ?清潔劑之間的交互作用鈍化消毒劑效力
　七、消毒劑的選擇和交替使用
　八、制藥工業(yè)常用的消毒劑
　?。ㄒ唬┐碱?br />　　（二）酚類化合物
　?。ㄈ┘句@鹽類化合物
　?。ㄋ模┮后w滅菌劑和殺芽孢劑
　九、消毒劑的效力確認(rèn)
　　（一）確認(rèn)時需要考慮的因素
　?。ǘ┈F(xiàn)場考察
　?。ㄈ?shí)驗(yàn)室考察
　?。ㄋ模┒繎腋≡囼?yàn)
　?。ㄎ澹┹d體浸泡定量試驗(yàn)
　十、消毒劑稀釋液的效期確認(rèn)
　十一、培訓(xùn)和安全教育
　十二、消毒劑消毒效果驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)（定量懸浮試驗(yàn)）實(shí)例
　?。ㄒ唬?yàn)證原理
　　（二）驗(yàn)證材料
　?。ㄈ?yàn)證方法（定量懸浮試驗(yàn)）
第五章 培養(yǎng)基、緩沖液、稀釋劑、淋洗液和試劑的驗(yàn)證
　一、培養(yǎng)基的概念與分類
　二、培養(yǎng)基的制備、融化程序的確認(rèn)及注意事項(xiàng)
　?。ㄒ唬┡囵B(yǎng)基的制備
　?。ǘ┡囵B(yǎng)基融化程序的確認(rèn)
　?。ㄈ┡囵B(yǎng)基制備應(yīng)注意事項(xiàng)
　三、培養(yǎng)基的儲存
　四、培養(yǎng)基的質(zhì)量控制
　　（一）外觀檢查
　?。ǘ﹑H檢查
　　（三）培養(yǎng)基的無菌性檢查
　?。ㄋ模┡囵B(yǎng)基的靈敏度檢查（促菌生長性）
　五、染色液與各種生化反應(yīng)試液的驗(yàn)證
　六、緩沖液、稀釋液與淋洗液
　　（一）無菌檢查用稀釋液、淋洗液及其制備方法
　　（二）微生物限度檢查用稀釋劑及其制備方法
　七、文件管理與標(biāo)簽
　八、有效期的確認(rèn)
　九、培養(yǎng)基靈敏度的驗(yàn)證試驗(yàn)實(shí)例
　　（一）無菌檢查培養(yǎng)基靈敏度的驗(yàn)證試驗(yàn)實(shí)例
　?。ǘ┪⑸锵薅葯z查培養(yǎng)基靈敏度的驗(yàn)證試驗(yàn)實(shí)例
附一 無菌檢查用培養(yǎng)基及其制備方法
　附二 微生物限度檢測用培養(yǎng)基及其制備方法
　附三 微生物限度檢測用試藥、試液與指示液
　附四 抗生素效價測定用培養(yǎng)基及滅菌緩沖液的制備方法
　附五 微生物檢測用生化試驗(yàn)培養(yǎng)基及試劑的制備方法
　附六 微生物檢測用試液、指示液、染色液的配制及染色法
第六章 滅菌法
　一、滅菌方法
　?。ㄒ唬駸釡缇?br />　?。ǘ└蔁釡缇?br />　?。ㄈ┹椛錅缇?br />　　（四）氣體滅菌法
　?。ㄎ澹┻^濾除菌法
　?。o菌生產(chǎn)工藝
　二、生物指示劑
　　（一）制備生物指示劑用微生物的基本要求
　?。ǘ┥镏甘緞┑闹苽?br />　?。ㄈ┥镏甘緞┑膽?yīng)用
　　（四）常用生物指示劑
　三、濕熱滅菌法驗(yàn)證試驗(yàn)實(shí)例
　　（一）產(chǎn)芽孢梭菌芽孢-生物指示劑驗(yàn)證乳劑類產(chǎn)品的滅菌工藝實(shí)例
　?。ǘ┥镏甘緞?yàn)證實(shí)例
　?。ㄈ┏Ｓ孟緶缇Чu價實(shí)驗(yàn)操作實(shí)例
第七章 藥品微生物檢驗(yàn)方法的驗(yàn)證
　一、確保藥品微生物檢測方法驗(yàn)證準(zhǔn)確性的關(guān)鍵因素
　?。ㄒ唬?yàn)證實(shí)驗(yàn)用微生物的種類及其生理特性
　?。ǘ?yàn)證用微生物接種液的制備
　?。ㄈ?yàn)證試驗(yàn)條件
　二、驗(yàn)證試驗(yàn)的原理與方法
　?。ㄒ唬◎?yàn)證的原理
　?。ǘ?yàn)證的合格標(biāo)準(zhǔn)
　?。ㄈ┧幤窡o菌檢查方法的驗(yàn)證
　　（四）藥品細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)檢查方法的驗(yàn)證
　　（五）藥檢控制菌檢查法的驗(yàn)證
　?。┧帣z中各控制菌檢測的注意事項(xiàng)
　三、驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的評價與報(bào)告
　四、驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)實(shí)例
　　實(shí)例（一）氟喹諾酮類藥物的無菌檢查方法驗(yàn)證
　　實(shí)例（二）××注射液的無菌檢查（薄膜過濾法）方法的驗(yàn)證方案示例
　　實(shí)例（三）微生物限度檢查方法（平皿菌落計(jì)數(shù)法）的驗(yàn)證方案示例
　　實(shí)例（四）大腸埃希菌檢查方法的驗(yàn)證方案示例
第八章 微生物檢測數(shù)據(jù)的趨勢分析和統(tǒng)計(jì)處理
　一、檢測數(shù)據(jù)的趨勢分析
　?。ㄒ唬z測數(shù)據(jù)趨勢分析的目的
　　（二）微生物檢測進(jìn)行趨勢分析的常規(guī)項(xiàng)目
　?。ㄈ┶厔莘治龅囊饬x
　二、微生物檢測數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)處理
　?。ㄒ唬┙y(tǒng)計(jì)學(xué)常用的變異指標(biāo)數(shù)值
　?。ǘ┱龖B(tài)（常態(tài)）分布（曲線）
　?。ㄈ﹖檢驗(yàn)與t分布
　?。ㄋ模〧檢驗(yàn)（方差分析）
　?。ㄎ澹│郑ㄗx作卡方）分析
　三、制備趨勢分析圖進(jìn)行分析
　四、微生物檢測數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)處理
　?。ㄒ唬┨禺惙磻?yīng)檢測值的剔除
　?。ǘ﹖檢驗(yàn)實(shí)例
　　（三）F檢驗(yàn)實(shí)例
　?。ㄋ模│謾z驗(yàn)實(shí)例
　?。ㄎ澹┰囼?yàn)結(jié)果的合并計(jì)算
　五、統(tǒng)計(jì)例題的微機(jī)運(yùn)算
　　（一）配對試驗(yàn)t檢驗(yàn)微機(jī)運(yùn)算
　?。ǘ┒嘁蛩谾檢驗(yàn)微機(jī)運(yùn)算
　　（三）配對試驗(yàn)χ（卡方）檢驗(yàn)
　?。ㄋ模┝糠磻?yīng)平行線測定隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)（3.3）法的微機(jī)運(yùn)算
　　（五）常規(guī)檢定中的合并計(jì)算微機(jī)運(yùn)算
　六、微生物檢測數(shù)據(jù)分析應(yīng)注意的問題
第九章 有關(guān)微生物檢測（查）的操作方法
　一、抗生素微生物檢定
　?。ㄒ唬┕艿?br />　?。ǘ岫确?br />　二、細(xì)菌內(nèi)毒素檢查
　?。ㄒ唬┠z法操作
　　（二）凝膠半定量試驗(yàn)
　?。ㄈ┕舛葴y定法操作
　三、無菌檢查
　?。ㄒ唬┍∧み^濾法
　　（二）直接接種法
　?。ㄈo菌檢查結(jié)果判斷
　四、微生物限度檢查
　?。ㄒ唬┕┰囈旱闹苽?br />　　（二）細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)
　?。ㄈ┛刂凭鷻z查
　?。ㄋ模┪⑸锵薅葯z查結(jié)果判斷
　　附（一）《中國藥典》（2005年版）（一部）微生物限度標(biāo)準(zhǔn)
　　附（二）《中國藥典》（2005年版）（二部）微生物限度標(biāo)準(zhǔn)
　五、鮮乳中抗生素殘留量檢驗(yàn)
參考文獻(xiàn)