組織細(xì)胞化學(xué)理論與技術(shù)

上篇 組織細(xì)胞化學(xué)理論
第一章 免疫組織細(xì)胞化學(xué)基礎(chǔ)
第一節(jié) 細(xì)胞
一、細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)及細(xì)胞學(xué)說的建立
二、細(xì)胞的形態(tài)
三、細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能
第二節(jié) 組織概述
一、組織的基本概念
二、組織的分類及結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
第三節(jié) 顯示細(xì)胞和組織成分、結(jié)構(gòu)的方法
一、光學(xué)顯微鏡技術(shù)
二、電子顯微鏡技術(shù)
三、組織化學(xué)技術(shù)
四、放射自顯影技術(shù)
五、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)與組織工程
六、形態(tài)計(jì)量分析技術(shù)
第二章 組織細(xì)胞化學(xué)的免疫學(xué)與酶學(xué)基礎(chǔ)
第一節(jié) 抗體的發(fā)現(xiàn)及其特性
一、抗體的發(fā)現(xiàn)
二、抗體的理化性質(zhì)
三、抗體的生物學(xué)活性
四、抗體的分類
五、抗體的特性
第二節(jié) 免疫球蛋白分子
一、免疫球蛋白分子的基本結(jié)構(gòu)
二、免疫球蛋白分子的功能
三、免疫球蛋白分子的抗原性
四、免疫球蛋白分子的超家族特點(diǎn)
第三節(jié) 組織細(xì)胞化學(xué)的酶學(xué)基礎(chǔ)
一、酶的概念及本質(zhì)
二、酶的分類及特性
三、酶促反應(yīng)的影響因素
第三章 免疫組織化學(xué)基本理論
第一節(jié) 免疫組織化學(xué)的基本原理、發(fā)展及展望
一、免疫組織化學(xué)的基本原理
二、免疫組織化學(xué)技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用
第二節(jié) 免疫組織化學(xué)技術(shù)的分類
一、根據(jù)標(biāo)記物是否與特異性第一抗體結(jié)合分類
二、根據(jù)標(biāo)記物或呈色物的不同分類
三、標(biāo)記抗原法
第三節(jié) 免疫組織化學(xué)技術(shù)常用儀器設(shè)備、器皿準(zhǔn)備及試劑配制
一、實(shí)驗(yàn)儀器
二、器皿準(zhǔn)備
三、器皿的清洗
四、玻片的處理
五、主要試劑及配制
第四節(jié) 免疫組織化學(xué)標(biāo)本的獲取及處理
一、冰凍切片標(biāo)本的獲取與處理
二、石蠟切片標(biāo)本的獲取與處理
三、細(xì)胞標(biāo)本的獲取與處理
第五節(jié) 免疫組織化學(xué)染色后的觀測
一、觀察儀器設(shè)備
二、檢測方法
第六節(jié) 常用免疫組織化學(xué)技術(shù)的注意事項(xiàng)
一、常規(guī)注意事項(xiàng)
二、免疫熒光化學(xué)技術(shù)的注意事項(xiàng)
三、免疫酶化學(xué)技術(shù)的注意事項(xiàng)
第四章 酶組織化學(xué)
第一節(jié) 福爾根顯示DNA的方法
第二節(jié) 高碘酸-雪夫反應(yīng)顯示糖原和其他多糖
第三節(jié) 異丙醇油紅O法
第四節(jié) 堿性磷酸酶顯示法
第五節(jié) 堿性磷酸酶與PAS反應(yīng)合并染色法
第六節(jié) 酸性磷酸酶顯示法
第七節(jié) 腺苷三磷酸酶顯示法
第八節(jié) 葡萄糖-6-磷酸酶鉛法顯示
第九節(jié) 偶氮耦聯(lián)法顯示非特異性酯酶
第十一節(jié) 同時(shí)耦聯(lián)法顯示氨基肽酶
第十二節(jié) 細(xì)胞色素氧化酶顯示法
第十三節(jié) 琥珀酸脫氫酶顯示法(四唑鹽法)
第十四節(jié) 乳酸脫氫酶顯示法
第十五節(jié) 3p一羥甾體脫氫酶顯示法
第五章 原位雜交組織化學(xué)
第一節(jié) 探針制備
一、探針的來源
二、探針標(biāo)記
第二節(jié) 原位雜交的組織標(biāo)本制作
第三節(jié) 雜交組織化學(xué)反應(yīng)
第四節(jié) 實(shí)驗(yàn)對照
第五節(jié) 生物素標(biāo)記探針交方法
第六章 神經(jīng)形態(tài)示蹤方法學(xué)
第一節(jié) 辣根過氧化物酶示蹤技術(shù)
一、動(dòng)物麻醉及HRP的注入
二、動(dòng)物存活期的確定
三、動(dòng)物的灌注、取材
四、呈色反應(yīng)
五、結(jié)果判定
第二節(jié) 熒光染料追蹤技術(shù)
一、熒光染料溶液的配制
二、熒光染料的注射
三、動(dòng)物存活期的確定
四、動(dòng)物的灌注固定及取材
五、切片、貼片、封片
六、熒光顯微鏡觀察
第三節(jié) 放射自顯影神經(jīng)示蹤
第四節(jié) 順行示蹤技術(shù)
一、病毒示蹤法
二、葡聚糖追蹤法
三、凝集素追蹤法
第七章 形態(tài)定量技術(shù)及其應(yīng)用
第一節(jié) 概述
第二節(jié) 目前形態(tài)定量研究方法簡介
一、顯微分光光度計(jì)的應(yīng)用
二、流式細(xì)胞計(jì)的應(yīng)用
第三節(jié) 體視學(xué)概述
一、體視學(xué)的發(fā)展歷史
二、體視學(xué)的概念
三、體視學(xué)的基礎(chǔ)理論
四、體視學(xué)技術(shù)的常用參數(shù)
第四節(jié) 體視學(xué)技術(shù)的基本方法
一、設(shè)計(jì)
二、抽樣
三、測試
四、注意事項(xiàng)
第五節(jié) 體視學(xué)技術(shù)中各參數(shù)的計(jì)算
一、體積、體積分?jǐn)?shù)與平均體積
二、表面積密度、表面積與表面積體積比
三、長度密度、總長度與厚度
四、粒子的大小、數(shù)密度與數(shù)目
第六節(jié) 圖像分析儀在醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)研究中的應(yīng)用
一、圖像分析儀
二、圖像分析在醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果分析中的應(yīng)用
第八章 細(xì)胞凋亡
第一節(jié) 概述
一、細(xì)胞凋亡的概念
二、細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死的區(qū)別
三、細(xì)胞凋亡與程序性細(xì)胞死亡
四、細(xì)胞凋亡的生物學(xué)意義
第二節(jié) 與細(xì)胞凋亡相關(guān)的酶類
一、Caspase蛋白酶家族
二、介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的其他酶類
第三節(jié) 細(xì)胞凋亡的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑
一、細(xì)胞外部信號觸發(fā)的凋亡--死亡受體路徑
二、細(xì)胞內(nèi)部信號觸發(fā)的凋亡--線粒體路徑
三、粒酶B誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的途徑
四、細(xì)胞凋亡的其他途徑
第四節(jié) 細(xì)胞凋亡的調(diào)控
一、Bcl一2家族蛋白的調(diào)控作用
二、p53的調(diào)控作用
三、IAP家族蛋白的調(diào)控作用
四、病毒蛋白的調(diào)控作用
第五節(jié) 細(xì)胞凋亡與疾病一
一、細(xì)胞凋亡與自身免疫性疾病
二、細(xì)胞凋亡與腫瘤
三、細(xì)胞凋亡與病毒感染
四、細(xì)胞凋亡與神經(jīng)系統(tǒng)疾病
五、細(xì)胞凋亡與缺血性損傷
六、細(xì)胞凋亡與心血管疾病
第六節(jié) 細(xì)胞凋亡的研究方法
一、細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)觀察
二、流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡
三、細(xì)胞凋亡的生物化學(xué)研究方法
四、細(xì)胞凋亡的免疫化學(xué)分析方法
五、細(xì)胞凋亡的分子生物學(xué)研究方法
六、凋亡蛋白質(zhì)酶及其底物的檢測
七、其他檢測方法
下篇 組織細(xì)胞化學(xué)技術(shù)
第九章 組織化學(xué)技術(shù)的應(yīng)用
第一節(jié) 免疫組織化學(xué)ABC法檢測貓背根節(jié) c-jun、e-fos的表達(dá)
一、材料和方法
二、結(jié)果
三、結(jié)果分析
第二節(jié) 免疫組織化學(xué)SP法在檢測成年猴腦BDNF、NT4和NGF中的應(yīng)用
一、材料和方法
二、結(jié)果
三、結(jié)果分析與體會(huì)
第十章 用酶組化技術(shù)顯示貓脊髓Ⅱ板層一氧化氦合酶的表達(dá)
一、材料和方法
二、結(jié)果
三、結(jié)果分析與注意事項(xiàng)
第十一章原位雜交組織化學(xué)技術(shù)檢測貓背根節(jié) BDNF和NT3的mRNA的表達(dá)
第一節(jié) 材料和方法
一、實(shí)驗(yàn)儀器、試劑及其配制
二、實(shí)驗(yàn)方法
第二節(jié) 結(jié)果
一、BDNFmRNA雜交信號在DRG的分布
二、NT3mRNA雜交信號在DRG的分布
三、對照實(shí)驗(yàn)
第一節(jié) 結(jié)果分析與經(jīng)驗(yàn)體會(huì)
一、結(jié)果分析
二、經(jīng)驗(yàn)體會(huì)與注意事項(xiàng)
第十二章組織化學(xué)雙標(biāo)技術(shù)
第一節(jié) 脊髓Ⅱ板層NOS、BDNF樣神經(jīng)膨體的免疫組化與酶組化雙標(biāo)技術(shù)
一、材料和方法
二、結(jié)果
三、結(jié)果分析與討論
第二節(jié) 免疫組織化學(xué)和原位雜交雙標(biāo)技術(shù)檢測貓背根節(jié) BDNF、NT3及其mRNA
的表達(dá)
一、儀器與試劑
二、實(shí)驗(yàn)方法
三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
四、結(jié)果分析
五、經(jīng)驗(yàn)體會(huì)與注意事項(xiàng)
第十三章組織化學(xué)技術(shù)的關(guān)鍵與要點(diǎn)
第一節(jié) 高壓控制免疫組化非特異性反應(yīng)
一、材料和方法
二、結(jié)果
三、結(jié)果分析
第二節(jié) 組織化學(xué)標(biāo)本處理要點(diǎn)
第三節(jié) 組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)步驟操作中注意事項(xiàng)
第四節(jié) 組織化學(xué)結(jié)果顯色要點(diǎn)
附錄
附錄一 組織化學(xué)的常用試劑及處理
一、溶液的濃度
二、緩沖液表
三、常用封固劑
四、灌注固定
附錄二 原位雜交組織化學(xué)常用試劑及處理
一、雜交前準(zhǔn)備
二、關(guān)于探針的標(biāo)記
三、固定劑
四、LB培養(yǎng)
五、小量質(zhì)粒提取的主要試劑
六、雜交前處理
七、雜交用液
八、雜交后漂洗溶液
九、原位雜交信號顯示
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