植物分子生物技術(shù)應(yīng)用手冊

緒論
第一部分 植物基因資源的開發(fā)
　第一章 植物RNA的分離和純化
　　第一節(jié) 植物RNA分離純化的一般性原則
　　第二節(jié) 幾種代表性植物RNA分離純化程序
　　　一、擬南芥RNA的分離純化
　　　二、煙草RNA的快捷分離純化
　　　三、水稻組織RNA的分離純化
　　　四、禾谷類種子中RNA的分離純化
　　　五、林木類被子植物和裸子植物RNA的分離純化
　　參考文獻(xiàn)
　第二章 cDNA文庫的構(gòu)建
　　第一節(jié) 一般cDNA文庫構(gòu)建
　　　一、一般cDNA文庫構(gòu)建方法
　　　二、注意要點
　　第二節(jié) cDNA文庫構(gòu)建的新技術(shù)
　　　一、 CloneMinerTMcDNA文庫構(gòu)建模式
　　　二、CreatorTMSMARTTM cDNA文庫構(gòu)建模式
　　第三節(jié) 均一化cDNA文庫和差減cDNA文庫的構(gòu)建
　　第四節(jié) cDNA文庫的均一化與消減化的實驗操作程序
　　　一、儀器
　　　二、材料試劑
　　　三、注意事項
　　　四、步驟
　　參考文獻(xiàn)
　第三章 生物芯片技術(shù)——長寡核苷酸片段芯片法
　　第一節(jié) 概述
　　第二節(jié) 長寡核苷酸型芯片實驗
　　　一、實驗所需主要材料、設(shè)備
　　　二、實驗步驟
　　參考文獻(xiàn)
　第四章 RNA干擾技術(shù)
　　第一節(jié) 植物穩(wěn)定轉(zhuǎn)化載體的設(shè)計策略
　　　一、靶基因RNA內(nèi)部發(fā)夾狀反向重復(fù)載體
　　　二、異源3′-末端非編碼區(qū)誘發(fā)的靶基因的沉默
　　第二節(jié) 植物瞬時表達(dá)載體的設(shè)計策略
　　　一、農(nóng)桿菌介導(dǎo)的瞬時表達(dá)系統(tǒng)
　　　二、病毒誘導(dǎo)的基因沉默系統(tǒng)
　　　三、基因槍介導(dǎo)的瞬時表達(dá)系統(tǒng)
　　第三節(jié) 植物RNA干擾的生化分析
　　　一、材料
　　　二、方法
　　　三、注釋
　　參考文獻(xiàn)
　第五章 基因組DNA的分離純化技術(shù)
　　第一節(jié) 一般目的基因組DNA的分離純化
　　　一、酸性條件提取方法
　　　二、CTAB提取法
　　　三、PVP提取法
　　　四、CTAB裂解的陰離子交換樹脂法
　　　五、SDS裂解的陰離子交換樹脂法
　　　六、尿素提取法
　　　七、其他方法
　　第二節(jié) 高分子量基因組DNA的分離純化
　　　一、所需試劑
　　　二、提取步驟
　　　三、高分子量DNA的電泳檢查：脈沖電泳
　　參考文獻(xiàn)
　第六章 基因組DNA文庫的構(gòu)建技術(shù)
　　第一節(jié) 基因組DNA文庫的克隆系統(tǒng)
　　　一、細(xì)菌-質(zhì)粒克隆系統(tǒng)
　　　二、YAC克隆系統(tǒng)
　　　三、P1噬菌體克隆系統(tǒng)
　　第二節(jié) 細(xì)菌大片段基因組DNA文庫的構(gòu)建
　　　一、百萬堿基級核DNA制備
　　　二、載體的制備
　　　三、文庫構(gòu)建
　　第三節(jié) 基因組物理作圖
　　　一、重復(fù)雜交法
　　　二、熒光原位雜交法
　　　三、光學(xué)作圖法
　　　四、染色體步移法
　　　五、以DNA標(biāo)記為基礎(chǔ)的染色體著陸法
　　　六、測序法
　　　七、放射雜交體作圖
　　　八、HAPPY作圖法
　　　九、DNA指紋圖譜法
　　參考文獻(xiàn)
　第七章 基因遺傳定位技術(shù)——分子標(biāo)記及其應(yīng)用
……
第二部分 植物基因的轉(zhuǎn)化
第三部分 轉(zhuǎn)基因植物的分析和應(yīng)用