干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)指南

序
前言
第1章 干細(xì)胞的分離純化
1．1 密度梯度離心法
1．2 單抗貼壁鋪展法
1．3 免疫磁珠分選技術(shù)
1．4 流式細(xì)胞分選法
1．5 組織消化法
主要參考文獻(xiàn)
第2章 干細(xì)胞的鑒定
2．1 光學(xué)顯微鏡
2．2 電子顯微鏡
2．3 共聚焦顯微鏡
2．4 流式細(xì)胞術(shù)鑒定特異基因的表達(dá)
主要參考文獻(xiàn)
第3章 胚胎干細(xì)胞體外培養(yǎng)與定向誘導(dǎo)分化
3．1 胚胎干細(xì)胞分離培養(yǎng)
3．2 小鼠胚胎干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化
主要參考文獻(xiàn)
第4章 成體干細(xì)胞分離培養(yǎng)擴(kuò)增及體外分化
4．1 造血干／祖細(xì)胞
4．2 間充質(zhì)干細(xì)胞
4．3 神經(jīng)干細(xì)胞
4．4 血管內(nèi)皮祖細(xì)胞
4．5 肌肉干細(xì)胞
4．6 肝臟干細(xì)胞
4．7 胰腺干細(xì)胞
4．8 皮膚干細(xì)胞的擴(kuò)增及定向誘導(dǎo)分化
主要參考文獻(xiàn)
第5章干細(xì)胞體內(nèi)增殖分化
5．1 干細(xì)胞向成體動物體內(nèi)移植——nod／scid小鼠造血干／祖細(xì)胞移植
5．2 干細(xì)胞向動物胚胎移植——胚胎干細(xì)胞囊胚植入構(gòu)建嵌合體
5．3 體內(nèi)可見光成像技術(shù)用于干細(xì)胞研究
主要參考文獻(xiàn)
第6章干細(xì)胞增殖、分化及其調(diào)控的分析檢測
6．1 干細(xì)胞細(xì)胞周期檢測技術(shù)
6．2 干細(xì)胞分化檢測
6．3 干細(xì)胞增殖分化調(diào)控的研究策略
6．4 常規(guī)操作
6．5 增殖分化調(diào)控機(jī)制的研究
6．6 干細(xì)胞增殖分化調(diào)控研究范例i——由生命現(xiàn)象到功能分子
6．7 干細(xì)胞增殖分化調(diào)控研究范例ii——由功能分子到生命現(xiàn)象的調(diào)控
主要參考文獻(xiàn)
第7章 核移植技術(shù)
7．1 總論
7．2 核移植操作所需的主要設(shè)備與試劑
7．3 核移植技術(shù)的主要操作步驟
7．4 核移植技術(shù)的注意事項(xiàng)及影響因素
主要參考文獻(xiàn)
第8章 基因打靶技術(shù)
8．1 打靶載體構(gòu)建
8．2 中靶es細(xì)胞的篩選
主要參考文獻(xiàn)
第9章 干細(xì)胞與組織工程實(shí)驗(yàn)技術(shù)
9．1 干細(xì)胞與骨組織工程
9．2 干細(xì)胞與軟骨組織工程
9．3 干細(xì)胞與皮膚組織工程
9．4 干細(xì)胞與肌腱組織工程
9．5 干細(xì)胞與心肌組織工程
9．6 干細(xì)胞與血管組織工程
9．7 干細(xì)胞與肝組織工程
主要參考文獻(xiàn)
第10章 干細(xì)胞的保存與復(fù)蘇
10．1 造血干細(xì)胞低溫保存的生物學(xué)基礎(chǔ)
10．2 冷凍保護(hù)液的選擇
10．3 冷凍保存方法的選擇
10．4 冷凍保存的設(shè)備
10．5 造血干細(xì)胞的低溫保存方法
主要參考文獻(xiàn)
第11章 干細(xì)胞治療的臨床前研究
11．1 有效性研究
11．2 安全性研究
11．3 干細(xì)胞的采集、分離、鑒定及體外操作的質(zhì)量控制
第12章 干細(xì)胞治療的臨床(試驗(yàn))研究
12．1 臨床研究的產(chǎn)生及籌劃
12．2 臨床研究的不同階段
12．3 干細(xì)胞治療的臨床新技術(shù)申請
12．4 干細(xì)胞相關(guān)的臨床試驗(yàn)研究示例
主要參考文獻(xiàn)
第13章 干細(xì)胞與基因治療
13．1 基因治療概述
13．2 病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)導(dǎo)實(shí)驗(yàn)技術(shù)
13．3 干細(xì)胞的轉(zhuǎn)染
13．4 以干細(xì)胞為基因?qū)氚屑?xì)胞的基因治療臨床應(yīng)用策略及前景
主要參考文獻(xiàn)
附錄1 縮略語
附錄2 常用溶液配制方法
附錄3 主要共聚焦激光對應(yīng)常用熒光染料表
附錄4 合適小鼠卵的培養(yǎng)基配方(g/l)
附錄5 zimmermann細(xì)胞融合培養(yǎng)基成分(ph7．0)
附錄6 補(bǔ)加鍶的m16培養(yǎng)基
附錄7 fda／nih關(guān)于基因治療的相關(guān)文獻(xiàn)