化學(xué)標(biāo)記與探針技術(shù)在分子生物學(xué)中的應(yīng)用

第1章緒論1
1.1探針與標(biāo)記1
1.2探針的分類及其檢測(cè)技術(shù)2
1.3芯片技術(shù)3
1.4基于探針技術(shù)的單細(xì)胞和單分子檢測(cè)3
參考文獻(xiàn)5

第2章蛋白質(zhì)與核酸的熒光標(biāo)記6
2.1基本原理6
2.1.1熒光的產(chǎn)生6
2.1.2熒光探針的一些重要參數(shù)7
2.1.3分子結(jié)構(gòu)與熒光的關(guān)系8
2.1.4細(xì)胞內(nèi)常見(jiàn)的內(nèi)源性熒光分子9
2.1.5熒光探針9
2.2蛋白質(zhì)的熒光標(biāo)記10
2.2.1通過(guò)化學(xué)反應(yīng)進(jìn)行標(biāo)記10
2.2.2蛋白質(zhì)的特異性標(biāo)記方法16
2.2.3抗體的標(biāo)記25
2.3核酸的熒光標(biāo)記25
2.3.1寡核苷酸的標(biāo)記26
2.3.2核酸的標(biāo)記32
2.3.3通過(guò)生物素親合素系統(tǒng)進(jìn)行特異性標(biāo)記33
2.3.4核酸熒光探針的應(yīng)用33
參考文獻(xiàn)38

第3章小分子熒光探針39
3.1用于檢測(cè)陽(yáng)離子的小分子熒光探針39
3.1.1金屬離子熒光探針的基本結(jié)構(gòu)39
3.1.2檢測(cè)鉀離子和鈉離子的熒光探針41
3.1.3檢測(cè)鈣離子的熒光探針43
3.1.4檢測(cè)鎂離子的熒光探針45
3.1.5檢測(cè)鋅離子的熒光探針49
3.2用于檢測(cè)pH的小分子熒光探針53
3.3用于檢測(cè)陰離子的小分子熒光探針55
3.4用于檢測(cè)自由基的小分子熒光探針58
3.4.1檢測(cè)活性氧的熒光探針59
3.4.2檢測(cè)活性氮的熒光探針65
3.5用于測(cè)定酶活性的小分子熒光探針68
參考文獻(xiàn)68

第4章綠色熒光蛋白及其類似物71
4.1綠色熒光蛋白的化學(xué)結(jié)構(gòu)71
4.1.1一級(jí)結(jié)構(gòu)及發(fā)光原理71
4.1.2三維結(jié)構(gòu)72
4.2綠色熒光蛋白的性質(zhì)73
4.2.1GFP的光譜特性73
4.2.2GFP和它的突變體73
4.2.3雙光子激發(fā)75
4.2.4GFP的穩(wěn)定性75
4.2.5GFP的改進(jìn)75
4.3綠色熒光蛋白在分子生物學(xué)中的應(yīng)用76
4.3.1作為報(bào)告基因的應(yīng)用76
4.3.2作為融合標(biāo)簽的應(yīng)用77
4.3.3作為生物傳感器的應(yīng)用78
4.4綠色熒光蛋白類似物87
4.4.1來(lái)自珊瑚蟲(chóng)的熒光蛋白DsRed87
4.4.2來(lái)自海洋中三色紫羅蘭的熒光蛋白89
4.4.3來(lái)自地中海海葵中的熒光蛋白89
參考文獻(xiàn)90

第5章量子點(diǎn)熒光探針94
5.1量子點(diǎn)熒光探針的化學(xué)性質(zhì)94
5.2量子點(diǎn)熒光探針的光學(xué)性質(zhì)97
5.3量子點(diǎn)熒光探針在生物學(xué)中的應(yīng)用99
5.3.1量子點(diǎn)熒光探針用于細(xì)胞成像100
5.3.2量子點(diǎn)熒光探針用于體內(nèi)成像101
5.3.3量子點(diǎn)熒光探針用于熒光免疫分析103
5.3.4量子點(diǎn)熒光探針在FRET研究中的應(yīng)用104
5.4量子點(diǎn)熒光探針的毒性106
參考文獻(xiàn)106

第6章同位素標(biāo)記109
6.1放射性同位素的一些基本概念和檢測(cè)技術(shù)109
6.1.1放射性活度及其度量單位109
6.1.2放射性同位素的半衰期109
6.1.3放射性的測(cè)量111
6.2放射性同位素標(biāo)記的氨基酸探針和蛋白質(zhì)探針111
6.2.1氨基酸的放射性同位素標(biāo)記112
6.2.2蛋白質(zhì)和多肽的放射性同位素標(biāo)記112
6.2.3用標(biāo)記轉(zhuǎn)移技術(shù)研究蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)相互作用112
6.3放射性同位素標(biāo)記的核酸探針114
6.3.1放射性同位素標(biāo)記的DNA探針和RNA探針114
6.3.2放射性同位素標(biāo)記的寡核苷酸探針115
6.4放射性同位素標(biāo)記的小分子探針115
6.4.1放射性同位素標(biāo)記的底物在酶結(jié)構(gòu)研究中的應(yīng)用115
6.4.2放射性同位素標(biāo)記的底物在酶活性檢測(cè)中的應(yīng)用116
6.4.3放射性同位素標(biāo)記的小分子探針在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用117
6.4.4放射性同位素標(biāo)記的配體和藥物在正電子發(fā)射斷層顯像技術(shù)中的
應(yīng)用118
6.5穩(wěn)定性同位素標(biāo)記技術(shù)在蛋白質(zhì)組學(xué)定量分析中的應(yīng)用120
6.5.1代謝標(biāo)記方法120
6.5.2提取后標(biāo)記方法121
6.5.3反轉(zhuǎn)標(biāo)記方法122
參考文獻(xiàn)123

第7章自旋標(biāo)記125
7.1基本原理125
7.2蛋白質(zhì)和肽的自旋標(biāo)記126
7.2.1標(biāo)記方法126
7.2.2自旋標(biāo)記法用于研究蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)及動(dòng)力學(xué)126
7.2.3自旋標(biāo)記法用于研究蛋白質(zhì)核酸的相互作用131
7.2.4自旋標(biāo)記法用于研究蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)的相互作用134
7.3糖和糖苷的自旋標(biāo)記135
7.4脂質(zhì)的自旋標(biāo)記135
7.4.1脂質(zhì)的自旋標(biāo)記方法135
7.4.2自旋標(biāo)記的脂質(zhì)在生物膜結(jié)構(gòu)研究中的應(yīng)用136
7.4.3自旋標(biāo)記的脂質(zhì)在脂質(zhì)蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)相互作用研究中的
應(yīng)用136
參考文獻(xiàn)139