新藥藥理學(xué)研究方法

第1章分子藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法1
11核酸技術(shù)3
111質(zhì)粒操作3
112PCR技術(shù)6
113重組DNA技術(shù)14
114基因轉(zhuǎn)染技術(shù)18
115核酸雜交23
116基因芯片技術(shù)33
117反義核酸技術(shù)38
118RNA干擾42
12蛋白質(zhì)技術(shù)45
121常規(guī)蛋白質(zhì)定量方法45
122酶聯(lián)免疫吸附測定47
123聚丙烯酰胺凝膠電泳51
124Western印跡法57
125免疫共沉淀59
126酵母雙雜交62
127膜片鉗技術(shù)67
128放射配體受體結(jié)合實(shí)驗(yàn)73
13細(xì)胞培養(yǎng)和形態(tài)、功能檢測80
131常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)80
132原代大鼠細(xì)胞分離和培養(yǎng)85
133細(xì)胞凋亡檢測方法91
134流式細(xì)胞分析96
135免疫組織化學(xué)染色100
136酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法104
137單細(xì)胞微凝膠電泳107
參考文獻(xiàn)108
第2章新藥主要藥效學(xué)試驗(yàn)方法112
21中樞神經(jīng)系統(tǒng)藥物114
211麻醉藥物114
212鎮(zhèn)靜催眠藥123
213抗癲癇、抗驚厥藥物129
214抗帕金森病藥物145
215抗老年性癡呆藥物149
216抗精神分裂癥藥物156
217抗焦慮藥實(shí)驗(yàn)方法161
218抗抑郁藥物178
219鎮(zhèn)痛藥物192
2110中樞興奮藥物197
2111阿片戒斷反應(yīng)治療藥物199
22 心血管系統(tǒng)藥物202
221抗心律失常藥物202
222抗高血壓藥物207
223抗心肌缺血藥物211
224溶栓藥物218
225抗凝血藥物224
226抗血小板藥物227
227調(diào)血脂藥物和抗動(dòng)脈粥樣硬化藥物234
228防治腦缺血損傷藥物237
23抗腫瘤藥物242
231體外抗腫瘤試驗(yàn)242
232常規(guī)體內(nèi)抗腫瘤藥物試驗(yàn)245
233生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑的試驗(yàn)方法247
234原位移植模型抗腫瘤試驗(yàn)247
235抗腫瘤轉(zhuǎn)移試驗(yàn)249
236抗腫瘤血管新生藥物試驗(yàn)254
24抗細(xì)菌、真菌、病毒和寄生蟲藥物257
241抗細(xì)菌藥物257
242抗真菌藥物271
243抗乙型肝炎病毒藥物278
244抗人類免疫缺陷病毒藥物281
245抗瘧藥物286
25抗骨和關(guān)節(jié)病藥物291
251治療骨質(zhì)疏松癥藥物291
252促進(jìn)骨折愈合藥物293
253抗關(guān)節(jié)炎藥物295
26抗糖尿病藥物299
261糖耐量試驗(yàn)300
262化學(xué)誘導(dǎo)劑致動(dòng)物糖尿病模型300
263遺傳性糖尿病動(dòng)物模型試驗(yàn)303
264α葡糖苷酶活性測定305
27消化系統(tǒng)藥物306
271抗消化性潰瘍藥物306
272抗胃炎藥物309
273胃腸解痙藥物311
274催吐藥及止吐藥313
275瀉藥及止瀉藥315
276抗急性肝損傷藥物316
277抗肝纖維化藥物318
28血液系統(tǒng)藥物321
281防治貧血藥物321
282治療白細(xì)胞減少和粒細(xì)胞缺乏癥藥物323
283治療血小板減少癥的藥物325
284血容量擴(kuò)充劑326
29呼吸系統(tǒng)藥物328
291平喘藥物328
292鎮(zhèn)咳藥物334
293祛痰藥物336
210泌尿生殖系統(tǒng)藥物339
2101抗腎小球腎炎藥物339
2102促進(jìn)尿道結(jié)石排出藥物341
2103治療男性勃起功能障礙藥物344
2104治療良性前列腺增生藥物347
2105作用于子宮平滑肌藥物348
211抗放射病藥物352
參考文獻(xiàn)356
第3章新藥非臨床安全性評價(jià)方法366
31一般藥理學(xué)研究367
311目的和意義367
312實(shí)驗(yàn)材料和分組給藥367
313中樞神經(jīng)系統(tǒng)研究368
314心血管系統(tǒng)研究372
315呼吸系統(tǒng)研究373
316追加或補(bǔ)充的安全藥理學(xué)研究373
32單次給藥毒性試驗(yàn)374
321目的和意義374
322主要內(nèi)容和要求376
323急性毒性試驗(yàn)常用方法379
33重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)382
331目的和意義382
332主要內(nèi)容和要求383
333注意問題386
34遺傳毒性試驗(yàn)392
341鼠傷寒沙門菌誘變試驗(yàn)（Ames試驗(yàn)）392
342體外培養(yǎng)哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色體突變試驗(yàn)396
343小鼠的骨髓微核試驗(yàn)397
35生殖毒性試驗(yàn)401
351一般生殖毒性試驗(yàn)401
352致畸敏感期毒性試驗(yàn)403
353圍產(chǎn)期毒性試驗(yàn)405
36致癌試驗(yàn)407
361致癌試驗(yàn)的必要性407
362致癌試驗(yàn)原則409
363致癌試驗(yàn)的劑量選擇410
364哺乳動(dòng)物培養(yǎng)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化試驗(yàn)413
365動(dòng)物短期致癌試驗(yàn)414
366動(dòng)物長期致癌試驗(yàn)414
367生物技術(shù)藥物致癌試驗(yàn)416
37毒代動(dòng)力學(xué)在藥物長期毒性評價(jià)中的應(yīng)用417
371毒代動(dòng)力學(xué)研究的基本考慮和方法419
372長期毒性評價(jià)中藥物暴露評價(jià)的其他方面420
38免疫毒性試驗(yàn)420
381基本原則421
382常規(guī)毒性試驗(yàn)中免疫毒性相關(guān)指標(biāo)422
383額外的免疫毒性試驗(yàn)423
384免疫原性、自身免疫和免疫刺激425
39局部刺激性試驗(yàn)426
391皮膚刺激性試驗(yàn)426
392注射給藥部位刺激性試驗(yàn)428
393直腸刺激性試驗(yàn)430
394陰道刺激性試驗(yàn)430
395滴鼻劑和吸入劑刺激性試驗(yàn)431
396口腔用藥或滴耳劑刺激性試驗(yàn)432
397眼刺激性試驗(yàn)433
398溶血性試驗(yàn)434
310過敏性試驗(yàn)436
3101主動(dòng)皮膚過敏試驗(yàn)437
3102豚鼠最大化試驗(yàn)和Buehler試驗(yàn)439
3103嚙齒類局部淋巴結(jié)試驗(yàn)440
3104被動(dòng)皮膚過敏試驗(yàn)442
3105全身主動(dòng)過敏試驗(yàn)443
3106皮膚光毒性試驗(yàn)444
3107皮膚光過敏反應(yīng)試驗(yàn)446
3108過敏性試驗(yàn)的注意事項(xiàng)448
311藥物依賴性的動(dòng)物試驗(yàn)449
3111阿片類藥物的身體依賴性試驗(yàn)方法450
3112鎮(zhèn)靜催眠藥和抗焦慮藥的身體依賴性試驗(yàn)方法456
3113評價(jià)藥物精神依賴性的試驗(yàn)方法458
參考文獻(xiàn)464
第4章非臨床藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)方法466
41非臨床藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)設(shè)計(jì)467
411總體要求467
412研究項(xiàng)目468
413數(shù)據(jù)處理與分析470
414結(jié)果與評價(jià)470
415問題與處理思路471
42分析方法的建立與確證472
421方法學(xué)確證的定義和分類473
422對參照標(biāo)準(zhǔn)品的要求474
423化學(xué)分析方法的形成474
424方法學(xué)確證的建議476
425免疫分析方法和微生物分析方法的形成477
426確證后的方法在藥物分析中的應(yīng)用478
427檔案管理和方法學(xué)結(jié)果總結(jié)480
428術(shù)語481
429生物分析方法確證實(shí)例482
43化學(xué)藥物非臨床藥代動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)方法491
431單次給藥的藥代動(dòng)力學(xué)研究491
432多次給藥的藥代動(dòng)力學(xué)研究496
433口服藥物的吸收和生物利用度研究498
434給藥后藥物在體內(nèi)的組織分布研究500
435藥物在體內(nèi)的糞、尿、膽汁排泄研究505
436生物轉(zhuǎn)化研究509
437對藥物代謝酶活性的影響研究533
44生物技術(shù)藥物藥代動(dòng)力學(xué)研究方法537
441概論537
442常用分析方法544
參考文獻(xiàn)556
第5章新藥臨床前評價(jià)的試驗(yàn)設(shè)計(jì)與統(tǒng)計(jì)分析559
51試驗(yàn)設(shè)計(jì)概述559
511試驗(yàn)設(shè)計(jì)的意義559
512試驗(yàn)設(shè)計(jì)的原理560
513試驗(yàn)設(shè)計(jì)三要素561
514試驗(yàn)設(shè)計(jì)四原則561
515試驗(yàn)設(shè)計(jì)類型562
52假設(shè)檢驗(yàn)中樣本大小的估計(jì)563
521樣本大小估計(jì)所需要的前提條件563
522采用定量資料的單組設(shè)計(jì)、配對設(shè)計(jì)或交叉設(shè)計(jì)時(shí)樣本大小的估計(jì)564
523采用成組設(shè)計(jì)時(shí)所需的樣本含量565
524多個(gè)樣本均數(shù)的比較或完全隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)時(shí)所需樣本含量566
525兩總體概率比較時(shí)所需的樣本含量567
526多個(gè)樣本頻率比較時(shí)所需樣本含量568
53常見的試驗(yàn)設(shè)計(jì)類型及相應(yīng)資料的統(tǒng)計(jì)分析568
531正態(tài)分布的概念與正態(tài)性檢驗(yàn)568
532方差齊性的概念與方差齊性檢驗(yàn)570
533單組設(shè)計(jì)和配對設(shè)計(jì)及相應(yīng)資料的統(tǒng)計(jì)分析570
534成組設(shè)計(jì)及相應(yīng)資料的統(tǒng)計(jì)分析572
535單因素多水平設(shè)計(jì)及相應(yīng)資料的統(tǒng)計(jì)分析574
536優(yōu)效性、等效性和非劣效性檢驗(yàn)576
54較復(fù)雜的試驗(yàn)設(shè)計(jì)簡介579
541配伍組設(shè)計(jì)579
542拉丁方設(shè)計(jì)580
543交叉設(shè)計(jì)581
544析因設(shè)計(jì)583
545重復(fù)測量設(shè)計(jì)583
546正交設(shè)計(jì)584
547均勻設(shè)計(jì)585
55常見的定性資料的表達(dá)格式與統(tǒng)計(jì)分析586
551橫斷面研究設(shè)計(jì)的2×2表資料及其統(tǒng)計(jì)分析586
552隊(duì)列研究設(shè)計(jì)的2×2表資料及其統(tǒng)計(jì)分析588
553病例對照研究設(shè)計(jì)的2×2表資料及其統(tǒng)計(jì)分析588
554配對研究設(shè)計(jì)的2×2表資料及其統(tǒng)計(jì)分析589
555雙向無序R×C表資料及其統(tǒng)計(jì)分析590
556結(jié)果變量為有序變量的單向有序R×C表資料及其統(tǒng)計(jì)分析591
557雙向有序且屬性不同的R×C表資料及其統(tǒng)計(jì)分析593
558雙向有序且屬性相同的R×C表資料及其統(tǒng)計(jì)分析594
56按直線規(guī)律研究兩變量之間的相互關(guān)系與依賴關(guān)系595
561直線相關(guān)與回歸分析的基本概念595
562直線相關(guān)與回歸的正確步驟595
563直線相關(guān)與回歸分析常見錯(cuò)誤595
564直線相關(guān)與回歸分析計(jì)算公式及假設(shè)檢驗(yàn)596
565直線相關(guān)與回歸分析的區(qū)間估計(jì)問題——利用回歸方程進(jìn)行預(yù)報(bào)和控制
598
566直線相關(guān)與回歸分析應(yīng)用實(shí)例599
567用概率法求半數(shù)有效量600
57按曲線規(guī)律研究兩變量之間的依賴關(guān)系602
571曲線回歸分析的基本概念602
572曲線回歸分析的正確步驟604
573曲線回歸分析應(yīng)用實(shí)例605
574曲線回歸分析應(yīng)用中的常見錯(cuò)誤607
58單因素K水平（K≥2）設(shè)計(jì)生存時(shí)間數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析609
581生存時(shí)間數(shù)據(jù)特點(diǎn)及統(tǒng)計(jì)描述609
582由生存時(shí)間數(shù)據(jù)計(jì)算所得的多個(gè)生存率的假設(shè)檢驗(yàn)611
583由生存時(shí)間數(shù)據(jù)描述的生存曲線的比較612
59藥效學(xué)和毒理學(xué)的試驗(yàn)設(shè)計(jì)與統(tǒng)計(jì)分析614
591常見的試驗(yàn)設(shè)計(jì)模式與存在的問題614
592定量資料的數(shù)據(jù)結(jié)構(gòu)與統(tǒng)計(jì)分析方法的合理選擇620
593析因設(shè)計(jì)定量資料統(tǒng)計(jì)分析方法及實(shí)例621
594重復(fù)測量設(shè)計(jì)定量資料統(tǒng)計(jì)分析方法及實(shí)例622
參考文獻(xiàn)623
第6章新藥篩選方法學(xué)625
61樣品庫的建立626
611篩選樣品的要求626
612天然產(chǎn)物628
613提取物633
614組合生物催化637
615合成化合物641
62高通量細(xì)胞篩選模型651
621基于STAT3/5信號通路的藥物篩選模型651
622基于HIV Tat基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控通路的藥物篩選模型654
623基于X蛋白反式激活的抗HBV藥物篩選模型655
624基于干擾素α信號通路的抗病毒藥物篩選模型657
625基于PPARγ信號通路的藥物篩選模型659
626基于雌激素受體β亞型信號通路的藥物篩選模型662
627基于NFκB信號通路的藥物篩選模型664
63高通量篩選667
631高通量藥物篩選常用儀器667
632篩選操作668
633數(shù)據(jù)存儲(chǔ)和處理669
參考文獻(xiàn)669
第7章新藥發(fā)現(xiàn)過程中吸收、代謝、分布和毒性的研究674
71吸收的體外和原位模型675
711吸收的體外模型675
712在體單次灌流方法研究藥物在腸道的吸收678
72分布的體外模型680
721藥物與血漿蛋白結(jié)合實(shí)驗(yàn)680
722血腦屏障模型682
73代謝的體外模型684
731代謝穩(wěn)定性研究684
732代謝酶的確定686
733代謝酶抑制的測定687
734腸道菌群對藥物的代謝轉(zhuǎn)化研究690
74早期發(fā)現(xiàn)毒理學(xué)研究691
741預(yù)測模型691
742體外高通量毒性篩選692
743活性代謝產(chǎn)物的檢測695
744高內(nèi)涵篩選技術(shù)695
745動(dòng)物試驗(yàn)696
參考文獻(xiàn)696
附錄正常實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和模型動(dòng)物各項(xiàng)指標(biāo)參考值698
表1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物安全采血量698
表2外周血血細(xì)胞指標(biāo)（一）698
表3外周血紅細(xì)胞及血小板計(jì)數(shù)指標(biāo)（二）699
表4外周血白細(xì)胞及其分類計(jì)數(shù)（三）700
表5外周血白細(xì)胞指標(biāo)（四）701
表6血清生化指標(biāo)（一）701
表7血清生化指標(biāo)（二）702
表8血清生化指標(biāo)（三）702
表9心電圖指標(biāo)702
表10凝血和纖溶系統(tǒng)指標(biāo)703
表11常見動(dòng)物骨髓象703
表12實(shí)驗(yàn)動(dòng)物臟器重量704
表13實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體溫和血液溫度704
表14實(shí)驗(yàn)動(dòng)物臨床生理指標(biāo)705
表15實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料量、飲水量、產(chǎn)熱量705
表16實(shí)驗(yàn)動(dòng)物排便排尿量706
表17實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生殖生理指標(biāo)706
表18實(shí)驗(yàn)動(dòng)物蛋白指標(biāo)707
表19實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腸道長度708
表20雌性NOD/Lt小鼠不同周齡血糖變化708
表21kk小鼠攜帶AY基因飼喂高脂飼料后不同性別動(dòng)物的血糖變化710
表22kk小鼠攜帶AY基因飼喂繁殖飼料不同性別動(dòng)物的血糖變化710
表23kk小鼠未攜帶AY基因飼喂高脂飼料不同性別動(dòng)物的血糖變化711
表24kk小鼠未攜帶AY基因飼喂繁殖飼料不同性別動(dòng)物的血糖變化711
表25不同年齡nu/nu、nu/+小鼠脾臟中含免疫球蛋白的細(xì)胞（CIg）分布712
表26間接免疫熒光測定不同淋巴組織漿細(xì)胞中類型分布712
表27SCID小鼠相關(guān)數(shù)據(jù)713
表28自發(fā)性高血壓（SHR）大鼠與WKY大鼠血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)713
表29年輕自發(fā)性高血壓（SHR）大鼠（12周齡）生化檢驗(yàn)參數(shù)（一）713
表30年老自發(fā)性高血壓（SHR）大鼠（22周齡）生化檢驗(yàn)參數(shù)（二）714
表31年輕易卒中型自發(fā)性高血壓（SHRsp）大鼠（12周齡）生化檢驗(yàn)參數(shù)（三）
715
表32年老易卒中型自發(fā)性高血壓（SHRsp）大鼠（22周齡）生化檢驗(yàn)參數(shù)（四）
716
表33年輕WKY大鼠（12周齡）生化檢驗(yàn)參數(shù)（五）717
表34年老WKY大鼠（22周齡）生化檢驗(yàn)參數(shù)（六）718
縮略詞對照表719