玉米品種DNA指紋鑒定技術研究與應用

第一章 玉米種子質量鑒定技術的發(fā)展
第一節(jié) 玉米種子質量及種子質量檢測的重要性
第二節(jié) 主要的種子鑒定技術
一、常規(guī)鑒定技術
二、現(xiàn)代鑒定技術
第三節(jié) 分子技術在玉米品種鑒定中的發(fā)展趨勢
一、從RAPD標記到SSR標記的技術提升
二、從SSR標記到SNP標記的技術探索
三、從非功能標記向功能標記的轉變
第二章 玉米品種DNA指紋鑒定標準試驗體系的建立
第一節(jié) DNA提取方法的研究
一、DNA提取的基本方法及原理
二、DNA快速提取方法研究——堿煮法
三、高質量DNA提取方法研究——改良高鹽低pH法
四、果皮組織DNA提取方法研究
第二節(jié) PcR擴增反應程序和反應體系的研究
一、通用PCR擴增反應程序的建立
二、多重PCR擴增體系的建立
第三節(jié) 電泳檢測方法的研究
一、主要電泳檢測方法的比較
二、PAGE／快速銀染檢測法的研究
三、毛細管電泳多色熒光檢測與變性PAGE電泳銀染檢測兩種檢測方法的比較
四、毛細管電泳熒光檢測中的異常電泳類型及原因分析
第三章 核心引物的篩選確定及復合擴增體系的建立
第一節(jié) 玉米DNA指紋鑒定中核心引物組合法的確立
一、特征譜帶法、引物組合法和核心引物組合法的概念
二、特征譜帶法、引物組合法和核心引物組合法的比較研究
第二節(jié) 玉米通用SSR核心引物篩選及高通量多重PCR復合擴增體系建立
一、研究目的
二、研究思路
三、核心引物的篩選
四、核心引物的重新設計
五、熒光多重PCR組合的建立
第四章 玉米DNA指紋庫數(shù)據(jù)統(tǒng)計及建庫標準化規(guī)范
第一節(jié) DNA指紋庫數(shù)據(jù)的統(tǒng)計
一、建庫SSR引物基本信息
二、原始數(shù)據(jù)統(tǒng)計記錄方式
三、原始數(shù)據(jù)導入數(shù)據(jù)庫的方式
第二節(jié) 玉米DNA指紋數(shù)據(jù)庫建庫標準化規(guī)范的建立
一、標記方法及標記來源
二、檢測平臺
三、試劑質量保證
四、樣品的來源及性質
五、引物及流程的評估
六、不同來源數(shù)據(jù)的有效整合
七、構建品種DNA指紋模式庫
八、構建品種DNA指紋擴展庫
九、數(shù)據(jù)庫數(shù)據(jù)的隨機盲測
第五章 玉米DNA指紋數(shù)據(jù)庫管理系統(tǒng)的建立
第一節(jié) 數(shù)據(jù)信息表的整理
一、信息類資料
二、數(shù)據(jù)類資料
三、圖片類資料
第二節(jié) 分析功能的設計及實現(xiàn)
一、主要功能及定義
二、品種查詢比較功能的設計
三、親子鑒定功能的設計
四、品種指紋圖譜繪制功能的設計
五、一致性鑒定功能的設計
六、純度鑒定功能的設計
第三節(jié) 網(wǎng)站用戶權限分類及設計
第四節(jié) 未來發(fā)展戰(zhàn)略規(guī)劃
一、建立玉米DNA指紋國際聯(lián)合數(shù)據(jù)庫及管理系統(tǒng)
二、建立DNA指紋數(shù)據(jù)庫、分子標記輔助育種、單倍體育種技術三位一體的高效玉米育種技術體系
第六章 DNA指紋技術在玉米品種純度、一致性、特異性鑒定中的研究及應用
第一節(jié) DNA指紋技術在玉米品種純度鑒定中的應用研究
一、玉米雜交種純度鑒定核心引物的選擇標準
二、特定品種純度鑒定特異引物選擇標準
三、雙親互補帶型——適于玉米雜交種純度鑒定的譜帶類型
四、玉米雜交種純度鑒定具體工作流程
第二節(jié) DNA指紋技術在玉米品種一致性鑒定中的應用研究
一、一致性檢測中異型帶的類型
二、不同品種、不同位點一致性分布特征
三、一致性檢測標準的制定
四、造成品種一致性差的原因分析
第三節(jié) DNA指紋技術在玉米品種特異性鑒定中的應用研究
一、現(xiàn)行的形態(tài)DUS測試系統(tǒng)面臨的問題
二、分子技術在玉米特異性測試中的應用策略
三、分子測試標準的制定
四、需探討的幾個問題
第四節(jié) DNA指紋技術在玉米品種區(qū)域試驗中的應用
一、我國玉米區(qū)域試驗品種DNA指紋檢測工作歷程
二、玉米區(qū)域試驗品種DNA指紋檢測工作特點
三、DNA指紋監(jiān)控工作值得思考的幾個問題
四、玉米區(qū)試DNA指紋檢測工作的意義
五、關于加強品種市場管理的對策建議
第七章 玉米品種實驗室鑒定技術具體操作程序
第一節(jié) 玉米SSR標記鑒定技術
一、DNA提取
二、PCR擴增
三、電泳檢測
第二節(jié) 玉米種子清蛋白聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定技術
一、實驗目的
二、儀器設備與試劑
三、溶液配制
四、電泳操作技術
第三節(jié) 玉米種子酯酶同工酶等電聚焦電泳
一、實驗目的
二、儀器設備與試劑
三、溶液配制
四、電泳操作技術
附錄 法規(guī)文件匯編
國家玉米品種試驗DNA指紋鑒定管理辦法
玉米品種鑒定DNA指紋方法（NY／T1432—2007）
國家區(qū)試玉米品種一致性及真實性DNA指紋檢測技術
農(nóng)作物種子質量監(jiān)督抽查管理辦法
最高人民法院關于審理侵犯植物新品種權糾紛案件具體應用法律問題的若干規(guī)定
農(nóng)業(yè)植物新品種權侵權案件處理規(guī)定
北京市高級人民法院關于印發(fā)《北京市高級人民法院關于知識產(chǎn)權司法鑒定若干問題的規(guī)定（試行）》的通知
農(nóng)作物種子質量糾紛田間現(xiàn)場鑒定辦法
北京市種子管理站行政處罰條例
DNA指紋圖譜測試指南：分子標記選擇和數(shù)據(jù)庫構建（概要）
中華人民共和國種子法
農(nóng)業(yè)轉基因生物安全管理條例
中華人民共和國植物新品種保護條例實施細則（農(nóng)業(yè)部分）
主要農(nóng)作物品種審定辦法
農(nóng)業(yè)植物品種命名規(guī)定
主要參考文獻