醫(yī)學(xué)免疫學(xué)實驗

目 錄
前言
第一章 實驗動物基本操作 1
實驗一 實驗動物的抓取與固定方法 1
實驗二 實驗動物的給藥方法 4
實驗三 實驗動物的采血方法 7

第二章 免疫相關(guān)疾病動物模型建立 11
實驗一 小鼠實驗性自身免疫性腦脊髓炎模型的建立 11
實驗二 大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎模型的建立 14
實驗三 家兔 Masugi腎炎模型的建立 16
實驗四 小鼠過敏性哮喘模型的建立 19
第三章 免疫學(xué)常用小鼠品系 21
一、免疫學(xué)常用的野生型近交系小鼠 21
二、免疫學(xué)常用的轉(zhuǎn)基因、基因突變或基因敲除小鼠 22
第四章 細胞培養(yǎng)基本操作 33
一、體內(nèi)、體外細胞的差異和分化 33
二、體外培養(yǎng)細胞的分型 33
三、培養(yǎng)細胞的生長和增殖過程 34
實驗一 細胞培養(yǎng)器材的準備與無菌操作 36
實驗二 原代細胞培養(yǎng) 41
實驗三 細胞傳代培養(yǎng) 44
實驗四 細胞凍存與復(fù)蘇 46
實驗五 細胞計數(shù)與活力測定 48
第五章 免疫細胞的分離與制備 52
實驗一 人外周血單個核細胞的分離 52
實驗二 小鼠腹腔巨噬細胞的分離 55
實驗三 人外周血 NK細胞的分離 57
實驗四 小鼠骨髓樹突狀細胞的制備 61
實驗五 小鼠 CD4+T淋巴細胞的分離 64
實驗六 小鼠脾 B細胞的分離 66
第六章 免疫細胞功能檢測 69
實驗一 小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞實驗 69

實驗二 51Cr釋放法檢測 NK細胞殺傷活性的測定 71
實驗三 細胞毒性 T細胞功能測定 73
實驗四 樹突狀細胞對 CD4+T細胞的活化和增殖作用檢測 75
實驗五 樹突狀細胞誘導(dǎo) CD4+T細胞分化作用檢測 78
實驗六 調(diào)節(jié)性 T細胞免疫抑制功能實驗 81
實驗七免疫細胞凋亡檢測 84
實驗八免疫印跡法檢測免疫細胞信號蛋白 ERK活化 92
第七章 抗體的人工制備 98
實驗一 多克隆抗體的制備 98
實驗二 單克隆抗體的制備 100
第八章 經(jīng)典抗原抗體反應(yīng) 104 實驗一 直接凝集反應(yīng) 104
實驗二 間接凝集試驗 108
實驗三 單向瓊脂擴散實驗 110
實驗四 雙向瓊脂擴散實驗 112
實驗五 溶血空斑實驗 114
第九章 細胞因子檢測 117
實驗一 ELISA雙抗夾心法檢測細胞因子 117
實驗二 ELISOPT檢測細胞因子 119
實驗三 FACS檢測細胞因子 121
實驗四 Real-time PCR檢測細胞因子 123
實驗五 小鼠干擾素誘導(dǎo)的抗病毒活性的檢測 130
實驗六 趨化實驗檢測趨化因子的趨化功能 132
第十章 臨床免疫學(xué)實驗 135
實驗一 豚鼠速發(fā)型超敏反應(yīng) 135
實驗二 血清總 IgE水平測定 136
實驗三 結(jié)核菌素試驗 138
實驗四 化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)檢測腫瘤標志物 140
實驗五 酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測乙肝五項指標 141
實驗六 免疫熒光技術(shù)檢測抗核抗體 143
實驗七 膠體金斑點層析技術(shù)檢測早期妊娠 145
第十一章 設(shè)計性實驗 147
一、設(shè)計性實驗的選題、設(shè)計與實施 147
二、參考范例 151
主要參考文獻 154