簡明神經(jīng)生物學實驗技術(shù)手冊

一、神經(jīng)生理學實驗 （一）復合動作電位記錄 （二）體感誘發(fā)電位記錄（大腦皮質(zhì)） （三）在體神經(jīng)元動作電位的細胞內(nèi)記錄（脊神經(jīng)節(jié)） （四）細胞外記錄——丘腦腹后外側(cè)核的電活動 （五）全細胞記錄——缺氧預(yù)適應(yīng)腦提取液對ATP敏感性鉀電流的作用 （六）光遺傳學實驗——利用光遺傳學技術(shù)調(diào)控小鼠大腦皮層桶狀區(qū)S1BF神經(jīng)元的興奮變化 （七）fMRI實驗——前爪刺激引起大鼠大腦皮層血氧水平依賴的改變 二、神經(jīng)化學實驗 （一）微透析法——腦內(nèi)腺苷的測定 （二）突觸體——缺氧對大腦皮質(zhì)突觸體乳酸脫氫酶透出率的影響 三、神經(jīng)組織免疫細胞化學實驗 （一）免疫細胞化學染色法——面口部注射甲醛溶液后大鼠延髓背角內(nèi)的FOS樣陽性神經(jīng)元觀察 （二）免疫細胞化學雙標染色法——大鼠中縫核簇內(nèi)5-羥色胺樣陽性神經(jīng)元表達FOS蛋白 （三）免疫熒光細胞化學雙重標記染色法——大鼠三叉神經(jīng)節(jié)內(nèi)阿片斗受體與降鈣素基因相關(guān)肽共存的陽性神經(jīng)元 （四）放射性核素標記的原位雜交組織化學法——大鼠三叉神經(jīng)節(jié)內(nèi)鈣結(jié)合素mRNA陽性神經(jīng)元的分布 （五）包埋前免疫電鏡雙標記法——大鼠延髓背角內(nèi)γ-氨基丁酸能神經(jīng)元與P物質(zhì)能纖維終末的突觸聯(lián)系 （六）包埋前與包埋后免疫電鏡雙標記法——大鼠孤束核內(nèi)γ-氨基丁酸能纖維終末與P物質(zhì)受體樣--陽性神經(jīng)元的突觸聯(lián)系 四、神經(jīng)形態(tài)學實驗 （一）辣根過氧化物酶逆行示蹤法——大鼠脊髓灰質(zhì)向孤束核的投射 （二）熒光金逆行追蹤——延髓背角內(nèi)P物質(zhì)受體樣陽性神經(jīng)元向丘腦膠狀質(zhì)核投射 （三）植物凝集素（PHA-L）順行示蹤法——大鼠三叉神經(jīng)脊束核吻側(cè)亞核向三叉神經(jīng)運動核的投射 （四）生物素葡聚糖胺順行示蹤法——延髓背角淺層向臂旁外側(cè)核及丘腦腹后內(nèi)側(cè)核的投射 五、分子神經(jīng)生物學實驗 （一）總RNA的提取及cDNA的制備（三叉神經(jīng)節(jié)） （二）PCR檢測mRNA的含量（5-HT3受體） （三）重組質(zhì)粒DNA（pGEM-ChAT）的制備及限制性酶切分析 （四）十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳分析 （五）Western印跡法檢測乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶 六、神經(jīng)行為學實驗 （一）甲醛溶液致炎大鼠疼痛行為的觀察 （二）大鼠脊髓橫斷及半橫斷模型的復制 （三）慢性束縛應(yīng)激對大鼠空間學習記憶能力的影響 （四）創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙模型大鼠的自發(fā)活動和焦慮水平檢測 （五）急性缺氧預(yù)適應(yīng)對小鼠缺氧耐受性的影響