生物化學與分子生物學實驗指導

目錄
前言
實驗須知 1
實驗基本操作 4
一、玻璃儀器的洗滌 4
二、吸量管的使用 5
三、定量吸（移）液器 5
四、容量瓶及量筒 6
五、離心機及其使用方法 6
六、溶液的混勻 6
七、保溫 7
八、過濾 7
九、加熱 7
實驗一 血清蛋白質(zhì)醋酸纖維素薄膜電泳 8
實驗二 蛋白質(zhì)的兩性性質(zhì)及等電點測定 12
實驗三 血清蛋白質(zhì)的鹽析及白球比的測定 15
實驗四 雙縮脲法測定血清蛋白質(zhì)的含量 20
實驗五 凱氏定氮法測定蛋白質(zhì)含量 23
實驗六 RIPA法提取肝總蛋白質(zhì) 27
實驗七 血清蛋白質(zhì)的聚丙烯酰胺凝膠電泳 29
實驗八 影響酶活性的因素 33
一、溫度對酶活性的影響 33
二、pH對酶活性的影響 34
三、激動劑和抑制劑對酶活性的影響 35
實驗九 酶的競爭性抑制作用 37
實驗十 維生素C的定量測定 39
實驗十一 胰島素、腎上腺素對家兔血糖濃度的影響 43
實驗十二 飽食和饑餓小白鼠肝糖原含量的比較 46
實驗十三 葡萄糖氧化酶法測定血糖濃度 48
實驗十四 血清中甘油三酯的測定 51
一、方法一 52
二、方法二 53
實驗十五 血清中總膽固醇的測定 55
實驗十六 酮體的生成和利用 57
實驗十七 過氧化脂質(zhì)的測定 61
實驗十八 血清中肌酐濃度的測定（除蛋白堿性苦味酸法） 63
實驗十九 核酸的定量測定（紫外吸收法） 65
實驗二十 組織DNA的提取與鑒定 68
實驗二十一 DNA和RNA濃度的檢測 71
實驗二十二 大腸桿菌質(zhì)粒DNA的提取與純化 73
實驗二十三 肝總RNA的提取與瓊脂糖凝膠電泳鑒定 78
實驗二十四 反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)檢測肝甘油醛-3-磷酸脫氫酶mRNA 81
實驗二十五 大腸桿菌的轉(zhuǎn)化及重組子的篩選 87
實驗二十六 外源基因在大腸桿菌中的誘導表達 91
實驗二十七 質(zhì)粒DNA的限制性內(nèi)切酶消化及鑒定 94
實驗二十八 質(zhì)粒DNA與外源DNA的連接 97
實驗二十九 人血管生長因子基因（hVEGF）的PCR定點突變 99
實驗三十 熒光定量PCR檢測乙型肝炎病毒核酸 103
生物化學與分子生物學常用儀器設(shè)備介紹 107
一、通風櫥 107
二、恒溫搖床 108
三、細菌培養(yǎng)箱 109
四、PCR儀 112
五、臺式高速離心機 113
六、比色分析法及721-B型分光光度計 115
七、微量移液器 117
八、數(shù)顯恒溫水浴鍋 119
九、超凈工作臺 120
十、高壓蒸汽滅菌鍋 121
十一、pH計 123
十二、渦旋儀 124
分子生物學實驗技術(shù)無菌操作原則 125
分子生物學實驗無菌操作技術(shù)及注意事項 126
一、玻璃器皿的消毒和清潔 126
二、無菌器材和液體的準備 127
三、無菌操作過程 127
四、常用清潔液的配制方法 127
實驗報告格式與內(nèi)容 128