醫(yī)學生物化學與分子生物學實驗

目錄
生物化學實驗須知 1
第一部分 實驗基本操作
第一章 玻璃儀器洗滌與清潔 3
第二章 吸量器的選擇與使用 5
第三章 溶液的處理 8
第四章 實驗樣品的制備 9
第五章 實驗儀器介紹 11
第六章 實驗報告撰寫及要求 21
第二部分 生物化學實驗原理與技術
第七章 分光光度法 22
概述 22
實驗1 紫外分光光度法測定核酸與蛋白質含量 25
實驗2 血清蛋白的鹽析與定量 27
實驗3 Folin-酚試劑法測定蛋白質含量（Lowry基本法） 28
第八章 層析法 31
概述 31
實驗4 紙層析法分析轉氨基反應 38
實驗5 離子交換柱層析法分離血清蛋白 40
第九章 電泳法 44
概述 44
實驗6 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離混合蛋白質 49
第十章 離心分離技術 53
概述 53
實驗7 單個核細胞的分離——密度梯度離心法分離淋巴細胞 54
第十一章 酶促反應動力學實驗56
實驗8 用正交法測定幾種因素對酶活力的影響 56
實驗9 影響酶活性的因素 59
實驗10 堿性磷酸酶米氏常數(shù)的測定 61
第三部分 分子生物學實驗原理與技術
第十二章 基因工程基本技術 65
概述 65
實驗11 大腸桿菌感受態(tài)的制備及質粒轉化 66
實驗12 質粒DNA提取、濃度測定與純度鑒定 68
實驗13 重組質粒DNA的酶切鑒定 70
實驗14 聚合酶鏈反應（PCR）擴增基因 72
實驗15 動物組織總RNA的提取 75
實驗16 RNA質量檢測及cDNA鏈合成 77
實驗17 PCR擴增產物純化及瓊脂糖凝膠電泳回收 79
實驗18 DNA限制性內切酶酶切和酶切產物的回收 81
實驗19 目的基因與質粒載體的連接和轉化 83
實驗20 陽性克隆的篩選與鑒定 85
實驗21 外源基因的誘導表達與檢測 87
第十三章 基因表達與功能分析的基本方法 90
實驗22 實時定量PCR 90
實驗23 Westernblot檢測目標蛋白的表達 93
實驗24 免疫共沉淀（Co-IP）研究蛋白質相互作用 98
實驗25 染色質免疫沉淀法（ChIP）研究體內蛋白質與DNA的相互作用 102
第十四章 臨床生物化學與臨床分子生物學實驗 108
實驗26 堿性磷酸酶的提取和比活性測定 108
實驗27 正常和糖尿病大鼠血糖與血脂的檢測及激素對血糖的影響 111
實驗28 人頰黏膜上皮細胞基因組DNA的抽提及ACE基因多態(tài)性檢測 115
實驗29 乙醛脫氫酶突變基因型的檢測 117
實驗30 人血清同型半胱氨酸的測定 119