種雞場禽白血病凈化技術(shù)手冊

前言
章 種雞場禽白血病防控和凈化技術(shù)方案（version4．0）
節(jié) 原種雞場核心群外源性ALV的凈化
一、我國不同類型原種雞場核心群凈化ALV的迫切性和長期性
二、原種雞場核心群外源性ALV的凈化規(guī)程和操作方案
三、小型自繁自養(yǎng)黃羽肉雞或地方品種核心種雞群凈化的過渡性方案
四、核心群ALV過程中種蛋選留、孵化出雛及育成過程中的注意事項
五、實施凈化程序中外源性ALV檢測技術(shù)的選擇和改進(jìn)
第二節(jié) 祖代或父母代種雞場禽白血病感染的防控
一、選擇凈化的種源引進(jìn)雞苗
二、定期檢測和監(jiān)控引進(jìn)種群的感染狀態(tài)
三、預(yù)防橫向感染維持種雞群凈化狀態(tài)
第三節(jié) 種雞場要有科學(xué)合理的繁育和飼養(yǎng)管理制度
一、核心種雞群的雞合應(yīng)完全封閉
二、引進(jìn)種雞前必須做嚴(yán)格的ALV檢疫
三、不同來源的種蛋在孵化和出雛時必須嚴(yán)格分開
第四節(jié) 嚴(yán)格防止使用外源性ALV和其他免疫抑制性病毒污染的疫苗
一、外源性ALV污染疫苗對種雞群的危害性
二、需要特別關(guān)注的疫苗
三、對疫苗中外源性ALV污染的檢測方法
四、對疫苗中其他免疫抑制性病毒的檢測方法
第二章 禽白血病凈化過程中改進(jìn)的檢測技術(shù)
節(jié) 如何比較和選擇不同供應(yīng)商的ALVp27抗原ELISA檢測試劑盒
第二節(jié) 用IFA提高對細(xì)胞培養(yǎng)中ALV感染的檢測靈敏度
第三節(jié) 用IFA檢測雞血清ALV抗體
一、IFA與ELISA檢測血清抗體的相關(guān)性
二、用IFA檢測血清ALV抗體
三、IFA在判定血清ALV抗體效價中的應(yīng)用
第四節(jié) 種公雞精液中外源性ALV的分離培養(yǎng)技術(shù)及其應(yīng)用
第五節(jié) 北京峪口禽業(yè)ALV凈化示范場驗收合格后維持方案的建議
第三章 禽白血病防控疑難問題解答
1．什么是禽白血病？
2．禽白血病在雞群中流行時帶來的經(jīng)濟(jì)損失有多大？
3．我國養(yǎng)雞業(yè)在禽白血病防控上的經(jīng)驗教訓(xùn)是什么？
4．禽白血病病毒屬于什么病毒，它的形態(tài)特點是什么？
5．ALV基因組的基本結(jié)構(gòu)是什么？
6．ALV病毒粒子內(nèi)有哪些酶和蛋白質(zhì)成分？
7．ALV在細(xì)胞內(nèi)是如何復(fù)制的？
8．ALV有哪些實驗室宿主系統(tǒng)？
9．ALV有哪些亞群，是根據(jù)什么確定的？
10．ALV亞群與致病性有什么關(guān)系？
11．我國雞群中已確定有哪些亞群的ALV？
12．什么是復(fù)制缺陷型病毒？
13．什么是內(nèi)源性禽白血病病毒？
14．什么是外源性ALV？
15．內(nèi)源性ALV-E有致病性嗎？
16．細(xì)胞染色體基因組的這些內(nèi)源性白血病病毒的ev位點能產(chǎn)生游離病毒嗎？
17．內(nèi)源性ALV對禽白血病的診斷和檢測會有什么干擾作用？
18．為什么慢羽雞都帶有可以產(chǎn)生游離病毒的內(nèi)源性ALV-E？
19．外源性ALV的不同毒株的致病性相同嗎？
20．什么是急性致腫瘤性ALV？
21．急性致腫瘤性ALV可能有哪些腫瘤基因？
22．哪些因素會影響ALV感染雞后的致病性？
23．雞的哪些基因影響對ALV的易感性或抵抗力？
24．ALV在外界環(huán)境中抵抗力大小如何？
25．在雞群中和雞群間ALV是如何傳播的？
26．ALV的橫向傳播有什么特點？
27．ALV垂直感染是怎么發(fā)生的，有什么特點？
28．什么是ALV-E的遺傳性感染？
29．公雞在ALV傳播中起著什么樣的作用？
30．蚊蟲能傳播ALV嗎？
31．雞群感染ALV后會造成什么樣的致病作用？
32．ALV感染雞后誘發(fā)的特征性病變是什么？
33．ALV可以誘發(fā)哪些不同類型組織的腫瘤？
34．除了禽白血病外，雞群還有哪些不同病毒引起的腫瘤病？
35．除了造成腫瘤死淘外，ALV感染對雞群還有什么危害？
36．什么年齡的雞對ALV易感？
37．早期感染和成年以后感染對雞有何影響？
38．什么是持續(xù)性病毒血癥？
39．什么是一過性（短暫性）病毒血癥？
40．什么是免疫耐受性感染？
41．根據(jù)抗體和病毒血癥狀態(tài)，ALV感染雞群中有幾種不同感染狀態(tài)？
42．近二十年來禽白血病在我國雞群中發(fā)生的基本態(tài)勢是怎樣的？
43．我國ALV-J的來源是什么？
44．ALV-J是怎么傳進(jìn)我國蛋雞群中的？
45．ALV-J是怎么傳進(jìn)我國黃羽肉雞和地方品種雞群的？
46．我國白羽肉雞場J亞群白血病的發(fā)生和控制經(jīng)歷了哪些階段？
47．我國蛋用型雞場J亞群白血病的發(fā)生和控制經(jīng)歷了哪些階段？
48．我國黃羽肉雞和地方品種雞群中J亞群白血病的發(fā)生和控制現(xiàn)狀如何？
49．當(dāng)前我國黃羽肉雞和地方品種雞中流行的主要是什么亞群的ALV？
50．為什么現(xiàn)在僅僅從黃羽肉雞和地方品種雞分離到K亞群？說明什么？
51．ALV-K的致病性怎樣？
52．如何防控雞群禽白血??？
53．為什么現(xiàn)在沒有預(yù)防禽白血病的有效疫苗？將來呢？
54．為什么我國種雞群必須盡快實施白血病凈化？
55．種雞場實現(xiàn)白血病凈化后有什么直接經(jīng)濟(jì)效益和市場價值？
56．怎樣鑒別診斷禽白血??？
57．如何才能對腫瘤病雞做出確切的鑒別診斷？
58．如何實施對雞群（場）ALV感染狀態(tài)的鑒別診斷？
59．病理組織切片檢測對禽白血病臨床病例的鑒別診斷很重要嗎？
60．對腫瘤病雞，在分離到ALV時為什么同時還要做病理組織檢測？
61．對病理組織檢測判定為腫瘤的病雞為什么同時還要做病毒分離？
62．為了確定雞群（場）是否有ALV感染，哪種檢測方法可靠？
63．胎糞和蛋清樣品中p27檢測的假陽性反應(yīng)是從哪里來的？其他組織樣品中也有嗎？
64．為什么不提倡采集泄殖腔棉拭子作為檢查p27抗原的主要樣品？
65．泄殖腔棉拭子檢測p27會漏檢外源性ALV感染雞嗎？
66．為什么對種雞在開產(chǎn)初期及留種前既要采血分離病毒又要檢測蛋清中的p27？
67．為什么要強(qiáng)化種公雞的精液檢測？
68．為什么對公雞采血做了病毒分離后還要檢測精液？
69．如何檢測精液中的ALV感染？
70．如何利用精液進(jìn)行病毒分離？
71．如何從市場上選擇質(zhì)量好的ELISA-ALVp27抗原檢測試劑盒？
72．不同試劑盒檢測胎糞的結(jié)果經(jīng)常不一致，如何取合？
73．同一個體不同方法檢測（PCR、抗體檢測、病毒分離、棉拭子檢測等）結(jié)果不一致，如何處理？
74．在實施種雞場ALV凈化過程中需要解決的問題是什么？
75．要實現(xiàn)種雞場核心群凈化，必須實施的檢測和淘汰凈化的具體步驟是什么？
76．在一個種雞場核心群啟動凈化程序時，從上述步驟的哪一步開始較好？
77．在剛開始啟動凈化檢測的雞場，為什么不建議先從雛雞胎糞檢測這一步開始？
78．為什么在ELISA檢測前要在液氮中凍融胎糞？
79．為了組織好雛雞胎糞檢測p27這一步，有什么更多的建議？
80．為什么在孵化到18天時，要把同一只母雞的胚放在同一只出雛袋里出雛？
81．對出殼袋有什么技術(shù)要求？
82．為什么在處理完每只母雞后代雛雞后都要更換手套或在消毒水中洗手？
83．如果用消毒液洗手，應(yīng)該用什么消毒劑？
84．為什么在給雛雞出殼后注射疫苗時，對每一足母雞的后代都要更換針頭？
85．為什么雛雞出殼后經(jīng)胎糞p27檢測陰性的同一只母雞后代都應(yīng)在一個籠中隔離飼養(yǎng)？
86．對育雛階段的隔離籠有什么技術(shù)要求？
87．為什么選擇6～8周齡做次采血分離病毒？
88．為什么要將6～8周齡后選留的雞單籠飼養(yǎng)或小群飼養(yǎng)？
89．為什么選擇開產(chǎn)初期采血分離病毒？
90．為什么在留種前還要采血分離病毒？
91．為什么在收集種蛋前還要檢測蛋清（精液）p27抗原？
92．如果核心群經(jīng)過檢測淘汰后，選留母雞的數(shù)量不足以保持遺傳多樣性怎么辦？
93．在上面檢測凈化步驟中，為什么沒有提到血清抗體的檢測？
94．如何確保細(xì)胞培養(yǎng)分離病毒結(jié)果的可靠性？
95．為什么要保證細(xì)胞培養(yǎng)能維持到接種樣品后9天？
96．在凈化到一定程度，是否可以調(diào)整ELISA檢測p27抗原時判定陽性的s/p值？
97．達(dá)到什么標(biāo)準(zhǔn)后原種雞場核心群可以停止上述嚴(yán)格的凈化檢測程序？
98．種雞場核心群進(jìn)入凈化維持期后該執(zhí)行和實施哪些相關(guān)措施？
99．暫時沒有條件做細(xì)胞培養(yǎng)分離病毒的育種公司可以開展凈化嗎？
100．祖代種雞場如何預(yù)防控制禽白血??？
101．為什么要高度關(guān)注選用的弱毒疫苗中有無外源性ALV污染？
102．需要特別關(guān)注哪些疫苗的外源性ALV的檢測？
103．如何檢測疫苗中的外源性ALV污染？
104．單一的PCR技術(shù)檢測外源性ALV可靠嗎？
105．單純的p27檢測判定疫苗中有無外源性ALV污染可靠嗎？
106．為了凈化ALV，種雞場建設(shè)和飼養(yǎng)管理方面還有什么特殊要求？
107．在種雞核心群連續(xù)凈化過程中，每個世代種雞病毒血癥和蛋清p27陽性率平行下降嗎？
108．按照嚴(yán)格的檢測凈化方案，需要幾個世代才能實現(xiàn)凈化？
109．判斷一個核心種雞群是否實現(xiàn)凈化需要參考哪些檢測指標(biāo)？
110．為什么血清抗體檢測不能作為判斷雞群實現(xiàn)ALV凈化的指標(biāo)？
111．哪些因素可能誘發(fā)雞群血清中出現(xiàn)較高ALV抗體的假陽性反應(yīng)？
112．為什么某些遺傳背景的雞群或個體會產(chǎn)生ALV抗體假陽性反應(yīng)？
113．如何推測或判定血清ALV抗體的假陽性反應(yīng)？
114．ELISA檢測雞血清抗體呈現(xiàn)陽性，但間接免疫熒光分析（IFA）為陰性，如何判定？
115．ELISA檢測雞血清抗體呈現(xiàn)陰性，但免疫熒光分析（IFA）為陽性，如何判定？
116．當(dāng)雞群背景陽性率較高時如何制訂凈化程序？
117．在中國經(jīng)濟(jì)有效的凈化方案有哪些？
118．如果雞群凈化效果已達(dá)到病毒分離陽性率小于0．5％，如何進(jìn)一步做好凈化？
119．在一個核心種雞群實現(xiàn)ALV凈化后還需要繼續(xù)檢測嗎？