酶學(xué)實(shí)驗(yàn)手冊

1概述
2酶學(xué)分析的一般特性
2．1酶學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本要求004
2．2酶學(xué)測定必須遵循什么？006
2．2．1反應(yīng)級數(shù)006
2．2．2酶學(xué)反應(yīng)級數(shù)的重要性008
2．2．3酶反應(yīng)速率的測定010
2．2．4米氏方程022
2．2．5酶的抑制025
2．2．6多底物反應(yīng)030
2．2．7酶學(xué)實(shí)驗(yàn)的必要條件032
2．3儀器方面045
2．3．1光譜方法045
2．3．2電化學(xué)方法062
2．3．3放射性標(biāo)記法065
2．3．4其他方法065
2．4偶聯(lián)酶反應(yīng)理論066
2．4．1雙偶聯(lián)酶反應(yīng)066
2．4．2三偶聯(lián)反應(yīng)069
2．5底物測定069
2．5．1終點(diǎn)法070
2．5．2偶聯(lián)酶反應(yīng)的底物測定071
2．5．3動力學(xué)方法測定底物071
2．5．4酶的循環(huán)072
3酶學(xué)檢測實(shí)驗(yàn)
3．1酶的命名075
3．2酶實(shí)驗(yàn)操作中的注意事項(xiàng)077
3．3特殊酶實(shí)驗(yàn)080
3．3．1氧化還原酶，EC 1 080
3．3．2轉(zhuǎn)移酶，EC 2 116
3．3．3水解酶，EC 3 130
3．3．4裂解酶，EC 4 166
3．3．5異構(gòu)酶，EC 5 173
3．3．6連接酶類(合成酶），EC 6 177
3．3．7多酶復(fù)合體的檢測180
3．3．8底物測定185
3．4酶性質(zhì)的測定188
3．4．1蛋白質(zhì)定量188
3．4．2磷酸測定199
3．4．3糖蛋白測定200
3．4．4蛋白質(zhì)與二甲基辛二硝酸二鹽酸酯交聯(lián)201
3．4．5酶溶液濃縮202
3．5酶免疫測定207
3．5．1放射性免疫測定207
3．5．2非競爭固相酶免疫測定208
3．5．3競爭固相酶免疫測定208
3．5．4酶免疫測定方法及固定化技術(shù)210
4結(jié)合測定
4．1不同類型的結(jié)合215
4．1．1總論215
4．1．2如何識別專一可逆性結(jié)合？216
4．1．3實(shí)驗(yàn)方面217
4．2利用大小差異的結(jié)合測定219
4．2．1平衡透析220
4．2．2結(jié)合實(shí)驗(yàn)評估224
4．2．3超濾225
4．2．4凝膠過濾225
4．2．5超速離心226
4．3光譜法227
4．3．1示差分光法228
4．3．2熒光分光法233
4．4其他結(jié)合測定法237
4．4．1放射性標(biāo)記法237
4．4．2表面等離子共振法237
5酶的技術(shù)應(yīng)用
5．1酶的固定化模式239
5．1．1吸附法240
5．1．2包埋法241
5．1．3微囊法241
5．1．4交聯(lián)法242
5．1．5固相載體共價(jià)固定法243
5．2酶的固定化實(shí)驗(yàn)245
5．2．1尼龍珠微量包埋245
5．2．2聚丙烯酰胺包埋246
5．2．3玻璃表面共價(jià)固定化247
5．2．4可控孔洞玻璃表面共價(jià)固定化249
5．2．5聚酰胺共價(jià)固定化251
5．2．6聚酯固定化255
5．2．7對苯甲磺酰氯輔助的堿性水解、活化與固定化257
5．2．8羰基二咪唑參與的堿解、活化與固定化258
5．3固定化酶的分析259
5．3．1通則259
5．3．2固定化酶的連續(xù)光度測定260
5．3．3與固定化酶反應(yīng)的輔助因子261
5．4酶反應(yīng)器262
5．4．1批式反應(yīng)器（攪拌罐式反應(yīng)器）263
5．4．2膜反應(yīng)器263
5．4．3固定床反應(yīng)器263
5．4．4固定化細(xì)胞264
5．5生物傳感器264
5．5．1酶電極264
5．5．2免疫電極267
5．5．3其他生物傳感器267
5．6固定化酶用于治療268
附錄按照EC編號的酶列表
索引