蘇云金芽孢桿菌Cry1類毒素免疫廣譜檢測技術研究

　　采用正負篩選方法，成功獲得六株具有Cry1Ab毒素蛋白結合活性的陽性噬菌體單域抗體菌株，利用基因工程抗體易于定向修飾及Cry毒素具有相似結構的特點，以Cry1Ab毒素單域抗體基因為材料，通過同源建模及分子對接技術分析了Cry1Ab抗體與五種Cry1類毒素的關鍵氨基酸結合位點，以關鍵結合位點及其鄰近位點為目標，利用SPDBV軟件進行虛擬協(xié)同突變，預測親和力及廣譜性都有所提高的突變抗體并通過定點飽和突變技術定向改造母本抗體構建突變抗體庫；克隆表達了Cry1類毒素共性結構域并利用共性結構域蛋白包被和多種Cry1類毒素交替包被篩選策略，獲取了五個檢測對象可覆蓋多種Cry1類毒素的廣譜抗體，比較分析突變抗體和母本抗體的親和力及廣譜性，探索廣譜抗體識別區(qū)的分子結構特性，為建立高靈敏度多種Bt Cry毒素的免疫篩查方法和開發(fā)Cry毒素高效檢測技術奠定基礎。

　　焦凌霞，女，博士，副教授，河南農業(yè)大學碩士生導師，河南省教育廳學術技術帶頭人。主要從事食品生物技術的教學科研工作，主持和參加省部級以上項目10余項，發(fā)表SCI論文10余篇。