生化分離技術(shù)（第二版）

項目一發(fā)酵液的預(yù)處理
任務(wù)一微生物細(xì)胞破碎1
【知識目標(biāo)】1
【技能目標(biāo)】1
【必備知識】1
一、細(xì)胞破碎的方法1
二、選擇破碎方法的依據(jù)5
【知識拓展】 微生物的細(xì)胞壁6
【實(shí)例訓(xùn)練】利用機(jī)械和非機(jī)械細(xì)胞破碎法提取多酚氧化酶8
【技能拓展】細(xì)胞破碎率的測定9
任務(wù)二發(fā)酵液的預(yù)處理9
【知識目標(biāo)】10
【技能目標(biāo)】10
【必備知識】10
一、發(fā)酵液過濾特性的改變10
二、雜質(zhì)的去除12
【知識拓展】發(fā)酵液的組成13
【實(shí)例訓(xùn)練】維生素C發(fā)酵液的預(yù)處理14
任務(wù)三發(fā)酵液的固液分離15
【知識目標(biāo)】15
【技能目標(biāo)】16
【必備知識】16
一、粗濾16
二、離心分離18
【知識拓展】生化分離的一般過程及單元操作23
【實(shí)例訓(xùn)練】蔗糖密度梯度離心法提取葉綠體26
【技能拓展】低速大容量冷凍離心機(jī)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程27
目標(biāo)檢測29

項目二有機(jī)物質(zhì)的萃取
任務(wù)四有機(jī)溶劑萃取有機(jī)小分子物質(zhì)31
【知識目標(biāo)】31
【技能目標(biāo)】31
【必備知識】31
一、萃取的類型及原理31
二、有機(jī)溶劑萃取33
【知識拓展】35
一、反膠團(tuán)萃取35
二、液膜萃取37
【實(shí)例訓(xùn)練】有機(jī)溶劑萃取紅霉素38
【技能拓展】液固萃取40
任務(wù)五雙水相萃取生物大分子物質(zhì)40
【知識目標(biāo)】40
【技能目標(biāo)】40
【必備知識】40
一、雙水相萃取的基本原理40
二、雙水相體系的種類41
三、雙水相萃取的影響因素41
四、雙水相萃取的操作42
五、雙水相萃取的特點(diǎn)及應(yīng)用43
【知識拓展】超臨界萃取43
【實(shí)例訓(xùn)練】雙水相萃取細(xì)胞色素C45
【技能拓展】雙水相萃取操作中多聚物及鹽的后處理46
目標(biāo)檢測46

項目三生物大分子的沉淀與結(jié)晶
任務(wù)六鹽析法分級分離蛋白質(zhì)48
【知識目標(biāo)】48
【技能目標(biāo)】48
【必備知識】48
一、鹽析法的原理49
二、中性鹽的選擇49
三、影響鹽析的因素50
四、鹽析操作過程及其注意事項50
五、鹽析的應(yīng)用53
【知識拓展】54
一、有機(jī)溶劑沉淀54
二、血漿蛋白55
【實(shí)例訓(xùn)練】硫酸銨鹽析法分級分離血漿中的IgG56
任務(wù)七等電點(diǎn)沉淀法分離蛋白質(zhì)57
【知識目標(biāo)】58
【技能目標(biāo)】58
【必備知識】等電點(diǎn)沉淀58
【知識拓展】59
一、有機(jī)聚合物沉淀59
二、金屬離子沉淀60
三、有機(jī)酸沉淀60
四、牛乳中的蛋白質(zhì)61
【實(shí)例訓(xùn)練】等電點(diǎn)沉淀法分離牛乳中的酪蛋白62
任務(wù)八結(jié)晶法提純蛋白質(zhì)63
【知識目標(biāo)】63
【技能目標(biāo)】63
【必備知識】63
一、結(jié)晶的過程64
二、結(jié)晶條件的選擇與控制66
【知識拓展】胃液成分68
【實(shí)例訓(xùn)練】結(jié)晶法提純胃蛋白酶69
【技能拓展】結(jié)晶設(shè)備71
目標(biāo)檢測73

項目四膜分離
任務(wù)九超濾法分離生物大分子75
【知識目標(biāo)】75
【技能目標(biāo)】75
【必備知識】75
一、膜的分類及性能76
二、膜分離過程的類型77
三、膜組件77
四、濃差極化與消除措施79
【知識拓展】膜污染的清除79
【實(shí)例訓(xùn)練】超濾法濃縮明膠蛋白水溶液80
【技能拓展】中空纖維式超濾膜組件的完整性檢測82
任務(wù)十透析法除生物大分子中的無機(jī)鹽83
【知識目標(biāo)】83
【技能目標(biāo)】83
【必備知識】83
一、透析原理83
二、透析袋83
【知識拓展】膜的消毒與保存83
【實(shí)例訓(xùn)練】透析法去除蛋白質(zhì)溶液中的無機(jī)鹽84
目標(biāo)檢測85

項目五藥物的高度純化
任務(wù)十一離子交換色譜純化藥物87
【知識目標(biāo)】87
【技能目標(biāo)】87
【必備知識】87
一、色譜87
二、離子交換色譜89
【知識拓展】吸附95
【實(shí)例訓(xùn)練】離子交換色譜分離混合氨基酸96
任務(wù)十二凝膠色譜純化藥物97
【知識目標(biāo)】97
【技能目標(biāo)】97
【必備知識】97
一、色譜分離中凝膠的分類98
二、柱色譜凝膠的選擇99
三、凝膠柱色譜的操作99
【知識拓展】疏水柱色譜100
【實(shí)例訓(xùn)練】凝膠柱色譜純化蛋白質(zhì)類藥物101
【技能拓展】薄層色譜102
任務(wù)十三親和色譜純化藥物103
【知識目標(biāo)】103
【技能目標(biāo)】103
【必備知識】103
一、親和色譜的基本原理104
二、親和吸附劑 104
三、親和色譜的操作107
四、親和色譜的應(yīng)用108
【知識拓展】110
一、氣相色譜110
二、高效液相色譜111
【實(shí)例訓(xùn)練】親和色譜純化胰蛋白酶112
【技能拓展】紙色譜114
任務(wù)十四電泳法純化藥物115
【知識目標(biāo)】115
【技能目標(biāo)】115
【必備知識】115
一、電泳的凝膠介質(zhì)115
二、電泳分離的檢測方法116
三、電泳系統(tǒng)的構(gòu)成117
四、電泳分析常用方法120
【知識拓展】雙向電泳121
【實(shí)例訓(xùn)練】蛋白質(zhì)的醋酸纖維素薄膜電泳121
目標(biāo)檢測122

項目六藥物的干燥
任務(wù)十五藥物的干燥124
【知識目標(biāo)】124
【技能目標(biāo)】124
【必備知識】124
一、真空干燥法124
二、噴霧干燥法126
三、冷凍干燥法128
【知識拓展】130
一、遠(yuǎn)紅外線干燥130
二、微波干燥131
【實(shí)例訓(xùn)練】人工牛黃的真空干燥132
目標(biāo)檢測133

項目七生化藥物的提取分離
任務(wù)十六氨基酸類藥物的提取分離134
【知識目標(biāo)】134
【技能目標(biāo)】134
【必備知識】134
一、氨基酸類藥物的分類134
二、氨基酸的理化性質(zhì)136
三、氨基酸類藥物的生產(chǎn)方法137
四、氨基酸類藥物的分離方法139
【知識拓展】141
一、生物藥物的類型141
二、《中國藥典》收載的氨基酸類藥物142
【實(shí)例訓(xùn)練】143
實(shí)訓(xùn)L-胱氨酸的提取分離143
實(shí)訓(xùn)L-亮氨酸的提取分離145
目標(biāo)檢測146
任務(wù)十七多肽和蛋白質(zhì)類藥物的提取分離147
【知識目標(biāo)】147
【技能目標(biāo)】147
【必備知識】147
一、多肽類藥物148
二、蛋白質(zhì)類藥物148
三、多肽和蛋白質(zhì)類藥物的主要生產(chǎn)方法149
【實(shí)例訓(xùn)練】152
實(shí)訓(xùn)胰島素的提取分離152
實(shí)訓(xùn)谷胱甘肽的提取分離155
實(shí)訓(xùn)胸腺肽的提取分離156
目標(biāo)檢測157
任務(wù)十八核酸類藥物的提取分離158
【知識目標(biāo)】158
【技能目標(biāo)】158
【必備知識】158
一、核酸類藥物的分類159
二、核酸類藥物分離純化的要求159
三、核酸類藥物的生產(chǎn)方法160
四、核酸類藥物的分離方法161
五、重要核酸類藥物的制備162
【實(shí)例訓(xùn)練】163
實(shí)訓(xùn)DNA的提取分離163
實(shí)訓(xùn)ATP的提取分離164
目標(biāo)檢測166
任務(wù)十九酶類藥物的提取分離167
【知識目標(biāo)】167
【技能目標(biāo)】167
【必備知識】167
一、酶類藥物的性質(zhì)及特性167
二、酶類藥物的分類168
三、藥用酶原料來源及選擇169
四、酶類藥物的提取和純化170
【實(shí)例訓(xùn)練】174
實(shí)訓(xùn)溶菌酶的提取分離174
實(shí)訓(xùn)凝血酶的提取分離176
目標(biāo)檢測177
任務(wù)二十糖類藥物的提取分離179
【知識目標(biāo)】179
【技能目標(biāo)】179
【必備知識】179
一、糖類藥物的分類179
二、多糖的藥理作用180
三、糖類藥物的性質(zhì)181
四、糖類藥物的提取方法182
五、糖類藥物的分離純化方法182
【知識拓展】多糖含量測定與純度檢驗(yàn)方法184
【技能拓展】多糖常用提取方案與程序184
【實(shí)例訓(xùn)練】186
實(shí)訓(xùn)銀耳多糖制備及鑒定186
實(shí)訓(xùn)硫酸軟骨素的提取分離187
目標(biāo)檢測189
任務(wù)二十一脂類藥物的提取分離190
【知識目標(biāo)】191
【技能目標(biāo)】191
【必備知識】191
一、脂類藥物的分類191
二、脂類的性質(zhì)191
三、脂類藥物的臨床應(yīng)用192
四、脂類藥物的生產(chǎn)方法193
五、脂類藥物的分離方法193
【實(shí)例訓(xùn)練】194
實(shí)訓(xùn)卵磷脂的提取分離194
實(shí)訓(xùn)豬去氧膽酸的提取分離195
目標(biāo)檢測196
任務(wù)二十二抗生素與維生素類藥物的提取分離197
【知識目標(biāo)】197
【技能目標(biāo)】197
【必備知識】197
一、抗生素類藥物的提取分離197
二、維生素類藥物的提取分離205
【實(shí)例訓(xùn)練】206
實(shí)訓(xùn)青霉素的提取分離206
實(shí)訓(xùn)維生素B2的提取分離209
目標(biāo)檢測210

附錄
附錄1項目學(xué)習(xí)指南參考格式212
附錄2實(shí)例訓(xùn)練任務(wù)單參考格式214

參考文獻(xiàn)