動物生物化學(xué)實(shí)驗教程

目錄
第一章 動物生物化學(xué)實(shí)驗常識 1
第一節(jié) 生物化學(xué)實(shí)驗技術(shù)發(fā)展簡史 1
第二節(jié) 生物化學(xué)實(shí)驗須知 2
一、實(shí)驗室規(guī)則 2
二、實(shí)驗室安全及防護(hù)知識 2
第三節(jié) 生物化學(xué)實(shí)驗室基本操作 5
一、器皿的清洗 5
二、移液器的用法 6
三、離心管中液體的混勻 7
第二章 動物生物化學(xué)實(shí)驗常用樣品的處理 8
第一節(jié) 血液樣品的采集 8
一、采血前的準(zhǔn)備 8
二、采血部位的確定 8
三、血液采集的注意事項 8
第二節(jié) 血清的制備 9
第三節(jié) 全血及血漿的制備 9
一、抗凝劑種類 9
二、全血的制備 10
三、血漿的制備 10
四、血液的量取 10
第四節(jié) 無蛋白血濾液的制備 11
一、福林-吳憲（Folin-Wu）法（鎢酸法） 11
二、氫氧化鋅法 11
三、三氯乙酸法 12
第三章 離心技術(shù) 13
第一節(jié) 離心技術(shù)簡介 13
一、離心技術(shù)基本原理 13
二、離心機(jī)的類型和構(gòu)造 14
三、常用的離心方法 16
四、離心機(jī)操作的注意事項 19
第二節(jié) 離心技術(shù)實(shí)驗 20
實(shí)驗一 蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng) 20
實(shí)驗二 動物肝總RNA的分離制備 23
實(shí)驗三 堿性磷酸酶的分離制備 25
實(shí)驗四 肝糖原的提取和鑒定 27
實(shí)驗五 牛奶中酪蛋白的提取 28
第四章 分光光度技術(shù) 30
第一節(jié) 分光光度技術(shù)簡介 30
一、光譜與光度 30
二、分光光度法的基本原理 31
三、分光光度計的組成和構(gòu)造 32
四、分光光度計的使用方法 33
五、分光光度法的計算 35
六、分光光度計的分類 36
七、影響吸光系數(shù)的因素 36
八、使用分光光度計的注意事項 36
九、分光光度法的誤差和糾正 37
第二節(jié) 分光光度技術(shù)實(shí)驗 38
實(shí)驗一 血糖含量的測定——鄰甲苯胺法 38
實(shí)驗二 直鏈淀粉和支鏈淀粉含量的測定——雙波長法 40
實(shí)驗三 纖維素酶活力的測定 41
實(shí)驗四 蛋白質(zhì)含量的測定 46
實(shí)驗五 血清膽固醇的測定——磷硫鐵法 52
實(shí)驗六 紫外分光光度法測定DNA的含量 54
第五章 電泳技術(shù) 56
第一節(jié) 電泳技術(shù)簡介 56
一、電泳的基本原理 56
二、影響電泳遷移率的因素 56
三、電泳設(shè)備 58
四、電泳技術(shù)分類 58
五、常用的電泳方法 59
第二節(jié) 電泳技術(shù)實(shí)驗 68
實(shí)驗一 醋酸纖維素薄膜電泳分離血清蛋白質(zhì) 68
實(shí)驗二 聚丙烯酰胺凝膠電泳分離血清蛋白質(zhì) 71
實(shí)驗三 SDS-PAGE測定蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量 73
實(shí)驗四 DNA的瓊脂糖凝膠電泳 76
第六章 層析技術(shù) 79
第一節(jié) 層析技術(shù)簡介 79
一、層析技術(shù)的基本概念 79
二、層析技術(shù)的分類 81
三、幾種常用的層析方法 82
第二節(jié) 層析技術(shù)實(shí)驗 109
實(shí)驗一 氨基酸的分離鑒定——紙層析法 109
實(shí)驗二 離子交換層析分離氨基酸 110
實(shí)驗三 凝膠層析法分離純化蛋白質(zhì) 112
實(shí)驗四 卵磷脂的提取和鑒定 115
第七章 生物大分子制備技術(shù) 117
第一節(jié) 生物大分子制備技術(shù)簡介 117
一、生物材料的選擇 119
二、細(xì)胞的破碎 119
三、生物大分子的提取 120
四、生物大分子的分離純化 122
五、樣品的保存 128
第二節(jié) 生物大分子制備實(shí)驗 129
實(shí)驗一 動物組織DNA的提取與定量測定 129
實(shí)驗二 溶菌酶結(jié)晶的制備及活性測定 132
實(shí)驗三 細(xì)胞色素c的提取制備與含量測定 135
實(shí)驗四 親和層析純化血清IgG 138
實(shí)驗五 蛋白質(zhì)的鹽析和透析 140
參考文獻(xiàn) 143
附錄 145
附錄1 常用緩沖液的配制 145
附錄2 常用酸堿指示劑 148
附錄3 硫酸銨飽和度計算表 149
附錄4 層析法常用數(shù)據(jù)表及性質(zhì) 150
附錄5 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制和標(biāo)定 153
附錄6 常用實(shí)驗儀器的使用 154
附錄7 生物化學(xué)實(shí)驗常用詞中英文對照 158
附錄8 生物化學(xué)常用網(wǎng)絡(luò)資源 160