葡萄抗病基因功能研究

序
前言
第一章 引言
第一節(jié) 植物免疫系統(tǒng)
一、植物先天免疫系統(tǒng)
二、植物后天免疫系統(tǒng)
第二節(jié) 泛素/26S蛋白酶體系統(tǒng)及其功能
一、泛素化過程
二、不同類型的泛素連接酶
三、26S蛋白酶體
四、泛素/蛋白酶體途徑在植物防御反應(yīng)中的作用
第三節(jié) 研究目的與意義
第二章 材料與方法
第一節(jié) 試驗(yàn)材料
一、植物材料
二、質(zhì)粒載體與菌株
三、主要試劑
四、引物
五、培養(yǎng)基與試劑配制
第二節(jié) 試驗(yàn)方法
一、生物信息學(xué)分析
二、載體構(gòu)建
三、農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化
四、病原菌接種與病情調(diào)查
五、核酸分子操作方法
六、蛋白操作方法
七、酵母雙雜交試驗(yàn)
八、亞細(xì)胞定位試驗(yàn)
九、轉(zhuǎn)錄因子轉(zhuǎn)錄激活分析
十、雙分子熒光互補(bǔ)（BiFC）試驗(yàn)
十一、蛋白質(zhì)體內(nèi)降解試驗(yàn)
十二、啟動(dòng)子活性檢測(cè)試驗(yàn)
第三章 結(jié)果與分析
第一節(jié) UIRP1基因的克隆與序列分析
一、UIRP1基因的克隆
二、UIRP1基因序列分析
第二節(jié) UIRP1基因?qū)Σ≡捻憫?yīng)
第三節(jié) UIRP1基因的原核表達(dá)與酶活性分析
一、UIRP1基因的原核表達(dá)
二、UIRP1基因的酶活性分析
第四節(jié) UIRP1基因的亞細(xì)胞定位分析
第五節(jié) UIRP1基因啟動(dòng)子的克隆與功能分析
一、UIRP1基因啟動(dòng)子的克隆與序列分析
二、UIRP1基因啟動(dòng)子功能分析
第六節(jié) UIRP1基因互作蛋白的篩選
一、誘餌表達(dá)載體的構(gòu)建、毒性檢測(cè)與自激活分析
二、病原菌誘導(dǎo)的酵母表達(dá)cDNA文庫(kù)構(gòu)建
三、雜交篩選UIRP1基因的互作蛋白
第七節(jié) BiFC驗(yàn)證UIRP1基因與互作蛋白轉(zhuǎn)錄因子基因VpWRKY11的相互作用
第八節(jié) UIRP1基因的互作蛋白轉(zhuǎn)錄因子基因VpWRKY11的功能分析
一、轉(zhuǎn)錄因子基因VpWRKY11的序列分析
二、轉(zhuǎn)錄因子基因VpWRKY11的亞細(xì)胞定位分析
三、轉(zhuǎn)錄因子基因VpWRKY11的轉(zhuǎn)錄激活分析
四、轉(zhuǎn)錄因子基因VpWRKY11對(duì)病原菌的響應(yīng)
第九節(jié) UIRP1基因與互作蛋白轉(zhuǎn)錄因子基因VpWRKY11的相互作用模式分析
一、UIRP1基因作用在轉(zhuǎn)錄因子基因VpWRKY11的上游
二、UIRP1基因在體內(nèi)降解轉(zhuǎn)錄因子基因VpWRKY11
第十節(jié) UIRP1基因在擬南芥中過量表達(dá)分析
一、轉(zhuǎn)UIRP1基因擬南芥的鑒定與表型分析
二、轉(zhuǎn)UIRP1基因擬南芥的抗病性鑒定
三、轉(zhuǎn)UIRP1基因擬南芥中抗病相關(guān)基因的表達(dá)分析
第四章 討論
第一節(jié) 關(guān)于泛素連接酶基因研究
第二節(jié) 關(guān)于UIRP1基因參與植物抗病反應(yīng)
第三節(jié) 關(guān)于UIRP1基因與有關(guān)轉(zhuǎn)錄因子基因的相互作用
第四節(jié) 關(guān)于轉(zhuǎn)錄因子基因參與抗病的反應(yīng)方式
第五節(jié) 關(guān)于UIRP1基因作用底物
第六節(jié) 關(guān)于UIRP1基因泛素化轉(zhuǎn)錄因子基因VpWRKY11調(diào)控葡萄的抗病性
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)