植物蘋果酸脫氫酶基因功能研究

前言
第一章 蘋果酸脫氫酶的性質(zhì)及功能
第一節(jié) 蘋果酸脫氫酶的結(jié)構(gòu)、分類及酶學(xué)性質(zhì)的研究
第二節(jié) 植物中蘋果酸脫氫酶基因的克隆及其功能的相關(guān)
研究
第二章 植物蘋果酸脫氫酶與耐鋁機(jī)制的研究
第一節(jié) 植物對鋁的外部排斥機(jī)制
第二節(jié) 植物對鋁的內(nèi)部忍耐機(jī)制
第三節(jié) 植物MDHs與耐鋁性的研究
第三章 蘋果酸脫氫酶與植物的花發(fā)育
第一節(jié) 植物的花藥發(fā)育
第二節(jié) 花藥開裂的調(diào)控
第四章 大白菜蘋果酸脫氫酶基因研究的必要性
第五章 大白菜蘋果酸脫氫酶基因的亞細(xì)胞定位
第一節(jié) 試驗(yàn)材料
一、植物材料及載體
二、生化試劑
三、主要儀器
第二節(jié) 試驗(yàn)方法
一、亞細(xì)胞定位預(yù)測
二、亞細(xì)胞定位表達(dá)載體的構(gòu)建
三、融合重組載體轉(zhuǎn)入大腸桿菌
四、融合重組載體的檢測
五、擬南芥原生質(zhì)體的提取及轉(zhuǎn)化
六、熒光顯微鏡的觀察
第三節(jié) 結(jié)果與分析
一、亞細(xì)胞定位預(yù)測分析
二、重組載體的驗(yàn)證及其定位
第四節(jié) 本章 小結(jié)
第六章 BraChMDH在大白菜不同組織及鋁鹽脅迫下的
表達(dá)分析
第一節(jié) 試驗(yàn)材料
一、試驗(yàn)植物材料
二、生化試劑
三、主要儀器
第二節(jié) 試驗(yàn)方法
一、植物不同組織cDNA的獲取
二、引物的合成
三、BraChMDH在大白菜不同組織中的表達(dá)分析
四、鋁脅迫下大白菜葉片BraChMDH的表達(dá)變化
第三節(jié) 結(jié)果與分析
一、BraChMDH在大白菜92S24不同組織中的表達(dá)
模式
二、大白菜BraChMDH在鋁脅迫后上調(diào)表達(dá)
第四節(jié) 本章 小結(jié)
第七章 BraChMDH基因在擬南芥中的超量表達(dá)
功能分析
第一節(jié) 試驗(yàn)材料
一、植物材料
二、菌株及質(zhì)粒
三、生化試劑
四、主要儀器
第二節(jié) 試驗(yàn)方法
一、超量表達(dá)載體p2301-BraChMDH的構(gòu)建
二、p2301-BraChMDH轉(zhuǎn)入大腸桿菌DH5a
三、超量表達(dá)載體p2301-BraChMDH的檢測
四、超量表達(dá)載體p2301-BraChMDH對擬南芥的遺傳
轉(zhuǎn)化
五、超量轉(zhuǎn)基因擬南芥的篩選及PCR檢測
六、BraChMDH在超量轉(zhuǎn)基因擬南芥中的熒光定量
檢測
七、超量轉(zhuǎn)基因植株生長指標(biāo)的測定
八、轉(zhuǎn)基因植株的鋁鹽脅迫處理
九、擬南芥幼苗根系活力的測定
第三節(jié) 結(jié)果與分析
一、超量表達(dá)載體p2301-BraChMDH的構(gòu)建
二、超量表達(dá)載體農(nóng)桿菌檢測
三、轉(zhuǎn)基因植株抗性篩選及PCR檢測
四、BraChMDH 在轉(zhuǎn)基因擬南芥中的表達(dá)分析
五、BraChMDH超量表達(dá)導(dǎo)致擬南芥早抽墓
六、BraChMDH超量表達(dá)增強(qiáng)擬南芥生長勢
七、BraChMDH超量表達(dá)增強(qiáng)擬南芥的耐鋁性
第四節(jié) 本章 小結(jié)
第八章 BraChMDH基因在擬南芥中的干擾表達(dá)功能
分析
第一節(jié) 試驗(yàn)材料
一、植物材料
二、菌株及質(zhì)粒
三、生化試劑
四、主要儀器
第二節(jié) 試驗(yàn)方法
一、干擾表達(dá)載體 pRNAi-LIC-BraChMDH的構(gòu)建
二、干擾表達(dá)載體pRNAi-LIC-BraChMDH的檢測
三、干擾表達(dá)載體pRNAi-LIC-BraChMDH對擬南芥的
遺傳轉(zhuǎn)化
四、干擾轉(zhuǎn)基因植株的抗性篩選和PCR檢測
五、干擾轉(zhuǎn)基因擬南芥插入位點(diǎn)分析
六、干擾轉(zhuǎn)基因擬南芥的熒光定量檢測
七、干擾轉(zhuǎn)基因擬南芥花粉活力的測定
八、干擾轉(zhuǎn)基因擬南芥花器官的觀察
九、外源JA處理
第三節(jié) 結(jié)果與分析
一、干擾表達(dá)載體pRNAi-LIC-BraChMDH的構(gòu)建
二、干擾表達(dá)載體農(nóng)桿菌檢測
三、轉(zhuǎn)基因植株抗性篩選及PCR檢測
四、轉(zhuǎn)基因植株插入位點(diǎn)分析
第四節(jié) 本章 小結(jié)
一、該不育表型與JA的關(guān)系
二、該不育表型與AtMYB26的關(guān)系
參考文獻(xiàn)
附錄
縮略詞