分子生物學(xué)檢驗基礎(chǔ)與臨床

章 緒論
節(jié) 感染性疾病和腫瘤的分子診斷
第二節(jié) 單基因病和多基因病的分子診斷
第三節(jié) 基因診斷的常用技術(shù)
第四節(jié) 分子診斷面臨的問題
第二章 現(xiàn)代分子生物學(xué)的重要研究方法和技術(shù)
節(jié) 重組DNA技術(shù)
第二節(jié) 同源重組的機(jī)制
一、斷裂重接和異源雙鏈
二、枝鏈遷移
三、堿基對的錯配及消除
四、DNA分子的配對
第三節(jié) 基因沉默與基因敲除
一、基因沉默
二、基因敲除
第四節(jié) 基因表達(dá)差異分析
一、傳統(tǒng)研究基因表達(dá)差異的方法
二、差異展示技術(shù)
三、代表差異分析技術(shù)
四、基因表達(dá)系列分析技術(shù)
五、生物芯片技術(shù)
第三章 目的基因的獲得
節(jié) 從原核生物獲取目的基因
一、大腸桿菌的基因
二、用轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體分離宿主菌的基因
第二節(jié) 從真核生物獲取目的基因的常用方法
一、化學(xué)合成法
二、聚合酶鏈反應(yīng)
三、基因組DNA文庫
四、cDNA又庫
第三節(jié) 目的基因序列測定
一、目的基因序列測定的意義
二、目的基因測序方法
三、長鏈DNA測序的策略
第四章 重組載體的構(gòu)建與篩選
節(jié) 克隆載體的基本結(jié)構(gòu)和功能
一、基本結(jié)構(gòu)
二、功能
三、克隆載體的種類
四、表達(dá)載體的種類
第二節(jié) 重組載體的構(gòu)建
一、凝膠電泳
二、目的基因和載體的限制性內(nèi)切酶酶切的設(shè)計和應(yīng)用
三、目的基因和線狀載體DNA片段的分離和回收
四、目的基因與載體的連接策略
五、重組載體導(dǎo)入相應(yīng)細(xì)胞
六、重組DNA細(xì)胞的篩選
第五章 外源基因在宿主細(xì)胞中的表達(dá)與調(diào)控
節(jié) 原核基因表達(dá)的調(diào)控
一、原核生物的順式作用元件和轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白
二、翻譯的可調(diào)控性及調(diào)控方式
第二節(jié) 真核生物基因表達(dá)的調(diào)控
一、真核生物基因表達(dá)調(diào)控的分子機(jī)制
二、DNA和染色質(zhì)結(jié)構(gòu)對轉(zhuǎn)錄的調(diào)控
三、轉(zhuǎn)錄起始的調(diào)控
四、轉(zhuǎn)錄后的調(diào)控
五、翻譯的可調(diào)控性及調(diào)控方式
六、翻譯后加工的調(diào)控意義
第三節(jié) 外源基因的表達(dá)
一、外源基因的表達(dá)系統(tǒng)
二、外源基因高效表達(dá)的措施
第六章 核酸分子雜交技術(shù)
節(jié) 核酸分子雜交的基本原理
一、DNA變性與復(fù)性
二、雜交體系的建立
三、影響雜交的因素
第二節(jié) 核酸探針
一、探針的種類
二、標(biāo)記物
三、標(biāo)記方法
四、探針的純化
第三節(jié) 核酸分子雜交的基本方法
一、Southern印跡雜交
二、Northern印跡雜交
三、Westem印跡雜交
四、斑點及狹縫印跡雜交
五、原位雜交
六、液相雜交
第七章 聚合酶鏈反應(yīng)
節(jié) PCR的原理
一、PCR原理簡介
二、PCR的七種基本成分
三、PCR引物設(shè)計
四、模板的制備
第二節(jié) PCR基本反應(yīng)
一、以DNA為模板的反應(yīng)
二、以RNA為模板的反應(yīng)
三、PCR產(chǎn)物的積累規(guī)律
四、PCR反應(yīng)的自動化
五、PCR反應(yīng)條件的控制
第三節(jié) PCR的污染及對策
一、實驗室空間
二、操作和進(jìn)行PCR的規(guī)則
三、溶液和設(shè)備的去污染
四、PCR實驗中應(yīng)注意的事項
第四節(jié) PCR技術(shù)的主要類型
一、反轉(zhuǎn)錄PCR
二、筑巢PCR
三、共享引物PCR
四、多重PCR
五、不對稱PCR
六、錨定PCR
七、反向PCR
八、彩色PCR
九、原位PCR
十、差異顯示PCR
十一、重組PCR
第五節(jié) 定量PCR
一、內(nèi)參照定量PCR
二、競爭PCR作mRNA定量
三、酶標(biāo)記定量PCR
四、熒光素標(biāo)記的定量檢測
五、定量PCR技術(shù)的應(yīng)用
第六節(jié) PCR技術(shù)的主要用途
一、目的基因的克隆
二、基因的體外突變
三、DNA和RNA的微量分析
四、DNA序列測定
五、基因突變分析
第七節(jié) 連接酶鏈反應(yīng)
一、LCR的基本原理
二、LCR產(chǎn)物的檢測
三、影響LCR的重要因素
四、LCR技術(shù)的擴(kuò)展
第八節(jié) RNA的體外擴(kuò)增
一、基本原理
二、產(chǎn)物的檢測
三、RNA-PCR技術(shù)的特點和應(yīng)用
第八章 HLA的檢測與應(yīng)用
節(jié) 人類主要組織相容性復(fù)合體
一、HLA復(fù)合體結(jié)構(gòu)特征
二、HLA復(fù)合體遺傳特征
第二節(jié) 人類主要組織相容性抗原
一、HLA抗原的分子結(jié)構(gòu)
二、HLA抗原的表達(dá)及其調(diào)控
第三節(jié) HLA分型技術(shù)
一、血清學(xué)分型
二、細(xì)胞學(xué)分型
三、基因分型
第四節(jié) HLA與醫(yī)學(xué)的關(guān)系
一、HLA與疾病相關(guān)性
二、HLA抗原表達(dá)異常與疾病的關(guān)系
三、HLA與器官移植
四、HLA與輸血
五、HLA與法醫(yī)
第九章 腫瘤疾病的基因診斷
節(jié) 腫瘤的發(fā)生與基因
一、癌基因
二、抑癌基因
三、腫瘤的發(fā)生與多重基因變化
第二節(jié) 基因診斷在腫瘤研究中的意義和應(yīng)用
一、腫瘤易感基因的檢測
二、腫瘤的早期診斷和篩檢
三、腫瘤的分類
四、腫瘤的預(yù)后判斷
五、腫瘤的預(yù)后監(jiān)測
六、腫瘤的治療
第三節(jié) 腫瘤的基因診斷方法
一、腫瘤基因診斷的策略
二、腫瘤基因診斷的原理和方法
三、腫瘤基因診斷的具體方法
第四節(jié) 臨床常見腫瘤疾病相關(guān)基因的檢測
一、ras癌基因的檢測
二、抑癌基因p53的檢測
三、其他基因的檢測
第十章 感染性疾病的基因診斷
節(jié) 感染性疾病基因診斷的策略
一、一般性檢出策略和方法
二、完整檢出策略和方法
第二節(jié) 病毒性肝炎的基因診斷
一、肝炎病毒及其基因
二、病毒性肝炎的基因診斷
三、細(xì)菌性疾病的基因診斷
四、寄生蟲疾病的基因診斷
第十一章 呼吸系統(tǒng)疾病的基因檢測
節(jié) 肺癌與基因異常
一、概述
二、肺癌的基因異常
第二節(jié) 慢性阻塞性肺疾病與基因異常
一、概述
二、慢性阻塞性肺疾病與基因異常
第三節(jié) 支氣管哮喘與基因異常
一、概述
二、支氣管哮喘與基因異常
第四節(jié) 特發(fā)性肺纖維化與基因異常
一、概述
二、肺纖維化癥與基因異常
第五節(jié) 囊性纖維化與基因異常
一、概述
二、囊性纖維化與基因異常
第六節(jié) 肺部感染性疾病的基因診斷
一、肺結(jié)核病
二、支原體肺炎
三、人巨細(xì)胞病毒肺炎
第七節(jié) 呼吸系統(tǒng)疾病與基因治療
一、囊性纖維化和a1AT缺乏癥
二、惡性腫瘤
三、其他
四、載體的開發(fā)狀況
第八節(jié) 呼吸系統(tǒng)疾病與基因芯片
一、基因芯片簡介
二、基因芯片在部分呼吸系統(tǒng)疾病中的研究應(yīng)用現(xiàn)狀
第十二章 消化系統(tǒng)疾病的基因檢測
節(jié) 消化道腫瘤與基因異常
一、概述
二、消化腫瘤的基因診斷與基因治療
第二節(jié) 消化道感染性疾病與基因異常
一、病毒性肝炎
二、幽門螺桿菌感染
第三節(jié) 消化系統(tǒng)遺傳疾病與基因
第十三章 心血管疾病的基因檢測
節(jié) 心血管疾病基因檢測的常用分子生物學(xué)技術(shù)
一、基因克隆
二、多聚酶鏈反應(yīng)
三、基因轉(zhuǎn)移技術(shù)
四、基因打靶技術(shù)
五、反義核酸技術(shù)
六、候選基因關(guān)聯(lián)研究
七、定位克隆
八、動物模型
九、單倍型
十、節(jié)儉基因型
十一、MS分析方法
第二節(jié) 心血管疾病及其基因
第三節(jié) 心血管疾病基因單核苷酸多態(tài)性的檢測
第四節(jié) 基因表達(dá)芯片對心血管疾病的檢測
第五節(jié) 載脂蛋白基因異常表達(dá)與高脂血癥和動脈粥樣硬化
第六節(jié) 載脂蛋白表型及基因型的檢測
一、載脂蛋白(a)表型
二、載脂蛋白E表型
三、載脂蛋白B基因多態(tài)性的檢測
四、載脂蛋白CⅢ基因型檢測
第十四章 產(chǎn)前診斷的基因檢測
節(jié) 含有胎兒遺傳信息的細(xì)胞成分及其種類
第二節(jié) 產(chǎn)前診斷的技術(shù)
第三節(jié) 基因檢測技術(shù)
第四節(jié) 產(chǎn)前診斷的內(nèi)容
一、染色體病
二、單基因遺傳病
三、宮內(nèi)感染疾病
第十五章 重組DNA技術(shù)及其應(yīng)用
節(jié) 重組DNA技術(shù)的應(yīng)用
一、重組DNA技術(shù)在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用
二、重組DNA技術(shù)在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用
三、基因工程在環(huán)境保護(hù)中的應(yīng)用
第二節(jié) 基因工程抗體
一、抗體工程技術(shù)
二、基因工程抗體的應(yīng)用
第十六章 蛋白質(zhì)組學(xué)及其在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用
節(jié) 蛋白質(zhì)組學(xué)研究的相關(guān)技術(shù)
第二節(jié) 蛋白質(zhì)組學(xué)在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用
一、在腫瘤中的應(yīng)用
二、在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病(CNS)中的應(yīng)用
三、在心血管疾病中的應(yīng)用
四、在感染性疾病中的應(yīng)用
五、在精神疾病中的應(yīng)用
六、在抗體工程中的應(yīng)用
七、在藥物開發(fā)中的應(yīng)用
八、其他
參考文獻(xiàn)